Re: [問題] Griess Reagent for NO assay
※ 引述《Aragora (Aragora)》之銘言：
: 測巨噬細胞加入LPS後所產生的NO.
: 1% sulfanilamide in 5% phosphoric acid
: and 0.1% naphthylethylenediamine dihydrochloride in water
: 所用的試劑.
: Sodium Nitrate做標準曲線.
: 25μM, 50μM, 75μM, 100μM, 250μM, 500μM, 750μM and 1000μM
: 將試劑與不同濃度Sodium Nitrate混合.置室溫下15分鐘.測吸光值546nm.
: 出來的結果完全沒有變化.
: 請問此試劑應有怎樣顏色上的變化?
: 還是有什麼地方我沒有注意到?
顏色會因為NO的含量多寡而改變(濃度越高 顏色會越黃--印象中記得是黃色)
室溫下反應10min,避光
實驗室 standard所用的稀釋濃度是
0, 1.5625, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50, 100uM
超過某一限度後 OD值會亂跳(超過griess reagent的上限)
這種事情我做過(還拼命的重複做了三次 後來才發現是一開始稀釋濃度太高)
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