Re: [求救] 融合瘤汙染?
※ 引述《bb89233 (life)》之銘言：
: ※ 引述《bibiman (大學讀六年＞＜)》之銘言：
: : 我在細胞融合之後以加HAT的RPMI養了幾天
: : 前兩天換加HT的RPMI+30%FCS的培養液
: : 今天鏡下發現培養液裡有類似線狀的原蟲在裡面游泳 = =
: : 應該是培養液本身有汙染，請問有得救嗎?
: 其實..是血清..建議你使用gold等級或是hybridoma專用的血清
是用多少倍數的顯微鏡看呢?
會游泳也可能是細菌污染
如果是細菌污染 我記得似乎有類似以gentamycin加PBS稀釋後處理幾個小時的解法@@
要網路上搜尋可靠的網頁看看 不過如果你的細胞狀況不甚健康...囧 可能很難救喔
: : 還是說有人有經驗嗎?
: : 免疫小鼠要花了我幾個月的時間啊~
: : 還有請問一下，胎牛血清非動化是把整瓶500 mL的血清在50~60度C水浴30分鐘，
: : 然後就整瓶冷藏?
: : 還是平常以-20度C冷凍，看需要多少時才取多少mL出來水浴?
: 一般來說..新的血清非凍化..我都會把它放在4度c的冰箱給它overnight
: 到了隔天就會還有一點小碎冰..然後再放置水浴槽56度c 2hr 就可以囉
: 接著就分裝到50ml的tube 就可以冰起來囉
我們實驗室習慣是在37度C水浴槽解凍 待整瓶FBS完全解凍後於56度C水浴槽加熱30分鐘
再以滅過菌的血清瓶收集過filter後的FBS,才進行分裝到50CC管
分裝後凍於-20冰箱 需要用時再取出解凍
: : 因為沒有細胞培養的經驗，又沒有人可以帶，都是自己一個人瞎摸索
: : 感謝
: 建議還是有經驗的人帶
: 參考一下囉
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◆ From: 140.116.143.219
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08/23 18:43, , 1F
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08/25 21:35, , 2F
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