Re: [問題]關於EMSA non-specific binding protein

看板Biotech作者 (徵鋼琴老師啦!)時間18年前 (2007/07/14 19:20), 編輯推噓5(501)
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※ 引述《achihla (gg)》之銘言: : 我的EMSA實驗的反應如下 : biotin-labeled probe: 20fmol : poly(dI。dC)。poly(dI。dC) 1ug : MgCl2 5mM : Tris 10mM : KCl 50mM : DTT 1mM : 得到的結果 : 有五個shift band 都無法被競爭掉 : 應該是non-specific binding protein : 請問大家再做EMSA時,也會有這麼多non-specific binding protein嗎? 你的意思是否是說shift無法被自己的cold probe競爭掉? 是否有pre-run...? 我剛做EMSA時沒有pre-run就會有這種現象 -- My immature blog http://www.wretch.cc/mypage/aggaci -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165

07/16 09:47, , 1F
有的shift可以被競爭掉 但有的不行,可是我也有pre-run
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07/16 09:49, , 2F
pre-run 50V 1hr30min
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07/16 12:28, , 3F
請問競爭倍數?競爭是哪一種?
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07/16 19:42, , 4F
我是用specific cold probe 200X去競爭
07/16 19:42, 4F

07/16 22:35, , 5F
歹勢,我沒這種情形,你就針對有被競爭掉的shift去研究吧
07/16 22:35, 5F

07/17 22:20, , 6F
感謝感謝!!
07/17 22:20, 6F
文章代碼(AID): #16cB5xmM (Biotech)
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