[問題] 將mRNA轉成cDNA

看板Biotech作者 (白衣天使黑心肝)時間18年前 (2007/07/04 16:05), 編輯推噓6(600)
留言6則, 4人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
請問版上先進 作進實驗室要開始作real time RT-PCR 目前所欲想的儀器是使用Roche 方法是利用SyBr Green進行染色 不過對這方面完全沒有經驗 加上我是老師的第一位研究生 所以.... 目前的構想是 像Roche購買SyBr Green套組加上sample cup 跟合作廠商訂製primer(follow先前已發表的paper) 萃細菌RNA-使用向廠商購買套組 但今天詢問Roche special list時 他有提到最好事先轉成cDNA在進行real time會比較好 但因為cDNA的資料實在是太少 以前教科書上也只說說將RNA以RTase處理便可以得到cDNA 但細節卻沒提到 RTase也是購買套組嗎? 要在額外加入nucleotide嗎? 謝謝回答.. 我剛去看了一些廠商的protocal 大約知道要使用的東西使哪些 不過protocal上的primer是使用oligo dT 不過原核細胞沒有polyA啊~ 我該怎麼辦? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.151.223

07/04 16:23, , 1F
是SYBR green.... (小聲)
07/04 16:23, 1F

07/04 16:26, , 2F
做RT有kit可以買,通常所需要的東西kit裡面都有 :)
07/04 16:26, 2F

07/04 16:37, , 3F
可以上網找英文protocol先看看要準備的東西有哪些
07/04 16:37, 3F
※ 編輯: belady 來自: 140.128.151.223 (07/04 16:44)

07/04 16:44, , 4F
謝謝一樓~我改好咧!
07/04 16:44, 4F
※ 編輯: belady 來自: 140.128.151.223 (07/04 16:46)

07/04 19:08, , 5F
random hexmer?
07/04 19:08, 5F

07/05 01:08, , 6F
謝謝版大先進們的幫忙~明天一早我會再跟老闆討論最後決定
07/05 01:08, 6F
文章代碼(AID): #16YrJ92Y (Biotech)
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