[問題] 將mRNA轉成cDNA
請問版上先進
作進實驗室要開始作real time RT-PCR
目前所欲想的儀器是使用Roche 方法是利用SyBr Green進行染色
不過對這方面完全沒有經驗 加上我是老師的第一位研究生
所以....
目前的構想是
像Roche購買SyBr Green套組加上sample cup
跟合作廠商訂製primer(follow先前已發表的paper)
萃細菌RNA-使用向廠商購買套組
但今天詢問Roche special list時 他有提到最好事先轉成cDNA在進行real time會比較好
但因為cDNA的資料實在是太少
以前教科書上也只說說將RNA以RTase處理便可以得到cDNA
但細節卻沒提到
RTase也是購買套組嗎?
要在額外加入nucleotide嗎?
謝謝回答..
我剛去看了一些廠商的protocal
大約知道要使用的東西使哪些
不過protocal上的primer是使用oligo dT
不過原核細胞沒有polyA啊~
我該怎麼辦?
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