[問題] 想請問一下關於Tricine SDS PAGE的問題
因為目前實驗的蛋白質分子量只有7kDa
用Glysine的gel去跑的話 會跑的很糟糕
所以實驗室的老師買了Tricine system的藥品
現在全部都已經配好了 只是每次跑膠時都有一些小問題
想問問看版上的大大有沒有什麼好方法可以解決
1.Separating配的是16.5%的 可是每次用49.5%T,6%C配出來顏色都會變成白色的
這樣算是正常嗎?(後來嘗試過用49.5%T,3%C配Separating 配出來就不會這樣
配出來也嘗試過跑膠 跑起來也沒有什麼不一樣的地方 想請問這樣的話對於結果
有什麼問題嗎?)
2.Stacking配好以後都需要30~45分鐘才會凝固 試過APS與Temed的量都增加
但是還是需要大約這些時間(Separating與Spacer都沒有這個問題?)
想請問到底是加的量出錯 還是原本就需要較久的時間
Stacking加的量如下:
49.5%T,3%C 0.25ml
Gel buffer 0.75ml
Water 2ml
10%APS 12μl
Temed 3μl
想麻煩版上的各位大大幫在下解決這些問題 謝謝<0>
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