Re: [問題] 請問一個flow的問題

看板Biotech作者 (stay by my side..)時間17年前 (2007/06/18 18:28), 編輯推噓1(101)
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※ 引述《soom ()》之銘言: : ※ 引述《unkilik (stay by my side..)》之銘言: : : 我的實驗是用含GFP的病毒去感染細胞 : : 我想看病毒到底有沒有進入細胞 : : 跑了Flow之後 : : 是否可以由FSC對SCC的圖看出有變化 : : 聽學長說如果細胞內的particle比較多 : : 散射也較大 導致SCC往上變化 : : 由我的實驗圖是可以看出一點點的變化 : : 可是卻沒有很明顯的shift : : 有人有高見的嘛 : : 我對Flow實在不太懂 : : 還有我想請問一下有類似的paper做相關的研究嗎 : 我們家也是用lentivirus感染細胞後跑flow測定病毒的titer : 相關的研究應該很多才是 : 就算實驗圖真的可以看的出差異 我猜其實也不怎麼能達到統計上的明顯差異吧 : 因為SSC雖然是看細胞的顆粒性沒錯 : 可是像是GFP這種等級的protein應該是對顆粒性的影響不大 : (沒記錯的話 FSC-SSC的典型代表圖是白血球會分成三群) : 一個才不到30 kDa的protein如果能被偵測的話 : 那細胞內的其他protein應該會造成很大的雜訊吧 : 像這種沒啥統計上明顯差異的圖 不龜毛的老闆還好 : 拿去給我們老闆看應該會被削一頓 : 另外我比較好奇的 : 既然你們都跑flow了 用的也是帶GFP的病毒 : 那為何不看螢光呢 這樣不是會有比較明顯的差異嗎?? 其實我沒問的很好 我的問題現在不是螢光有沒有表現 因為GFP有沒有表現我從Flow或是從螢光顯微鏡下就可以看出來了 而我的問題是如果病毒的顆粒進入細胞內 那從SSC是否可以看出變化 因為我做的研究是將病毒modification 有種情況下這個病毒不會產生GFP 當他沒產生GFP下 我就不知道到底是病毒沒進入細胞內 還是病毒進入細胞內兒沒表現 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.121.192.40

06/27 14:34, , 1F
基本上SSC並不是很好的判斷方式
06/27 14:34, 1F

06/27 14:35, , 2F
建議同時使用western等其它方式 同時偵測病毒較好
06/27 14:35, 2F
文章代碼(AID): #16TburZr (Biotech)
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