Re: [問題] 請問一個flow的問題
※ 引述《soom ()》之銘言：
: ※ 引述《unkilik (stay by my side..)》之銘言：
: : 我的實驗是用含GFP的病毒去感染細胞
: : 我想看病毒到底有沒有進入細胞
: : 跑了Flow之後
: : 是否可以由FSC對SCC的圖看出有變化
: : 聽學長說如果細胞內的particle比較多
: : 散射也較大 導致SCC往上變化
: : 由我的實驗圖是可以看出一點點的變化
: : 可是卻沒有很明顯的shift
: : 有人有高見的嘛
: : 我對Flow實在不太懂
: : 還有我想請問一下有類似的paper做相關的研究嗎
: 我們家也是用lentivirus感染細胞後跑flow測定病毒的titer
: 相關的研究應該很多才是
: 就算實驗圖真的可以看的出差異 我猜其實也不怎麼能達到統計上的明顯差異吧
: 因為SSC雖然是看細胞的顆粒性沒錯
: 可是像是GFP這種等級的protein應該是對顆粒性的影響不大
: (沒記錯的話 FSC-SSC的典型代表圖是白血球會分成三群)
: 一個才不到30 kDa的protein如果能被偵測的話
: 那細胞內的其他protein應該會造成很大的雜訊吧
: 像這種沒啥統計上明顯差異的圖 不龜毛的老闆還好
: 拿去給我們老闆看應該會被削一頓
: 另外我比較好奇的
: 既然你們都跑flow了 用的也是帶GFP的病毒
: 那為何不看螢光呢 這樣不是會有比較明顯的差異嗎??
其實我沒問的很好
我的問題現在不是螢光有沒有表現
因為GFP有沒有表現我從Flow或是從螢光顯微鏡下就可以看出來了
而我的問題是如果病毒的顆粒進入細胞內
那從SSC是否可以看出變化
因為我做的研究是將病毒modification
有種情況下這個病毒不會產生GFP
當他沒產生GFP下 我就不知道到底是病毒沒進入細胞內
還是病毒進入細胞內兒沒表現
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推
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