[問題] 分離有磷酸化的蛋白

看板Biotech作者 (麻煩陽春麵加個蛋)時間17年前 (2007/05/14 19:01), 編輯推噓5(500)
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我最近想利用western blot 的方法 將一個大約55kd的蛋白質分離 就是將他的phosphorylated form 和non-phosphorylated form分開 磷酸化的位置為serine 112 請問一下要如何分離呢?? 我目前是用8x10的 BioRad 的跑膠儀器 是否該用更大的跑膠儀器 還是要用幾%的gel去跑呢 因為55kd要大不大..要小不小的.. = = 而且我參考的PAPER 可以有明顯的分離.. 他們也是用western 的方法 請各位高手指點一下小弟 謝~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.212.241

05/14 19:24, , 1F
可以用2D試試
05/14 19:24, 1F

05/15 02:21, , 2F
2D 1D不太可能
05/15 02:21, 2F

05/18 11:22, , 3F
樓上難道沒看過磷酸化的band會稍微高一點嗎?
05/18 11:22, 3F

05/19 19:36, , 4F
推樓上,除此之外 我記得不同大小有不同濃度的PAGE適合跑
05/19 19:36, 4F

05/23 22:46, , 5F
先用phospho-ser的抗體做IP,再做Western
05/23 22:46, 5F
文章代碼(AID): #16I45lEI (Biotech)
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