Re: [問題] PCR跑出來都是smear
※ 引述《thewholeshit.bbs@ptt.cc (e04)》之銘言：
: 最近在用inverse PCR夾ㄧ段未知序列
: 可是出來的東西都是smear
: 我調整過tm值 template濃度 cycle數
: 用不同廠牌的taq
: 加formamide (有可能是GC-rich 但實際是不是並不清楚)
: 但是結果都一樣
: 請問這樣應該怎麼辦?
會不會是 ligation 的時候就出問題了?
建議盡量用低濃度的 DNA
template 也是盡量低濃度
另外可以嘗試的是把第一次 PCR 的產物稀釋一下當 template 再做第二次 PCR
(如果有另一組 primer 更好)
不知道有沒有 positive control 確定這個系統可以成功?
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