Re: [問題] Lipofectamine 2000
※ 引述《ad1980 (Apoptosis)》之銘言:
: 不好意思,因為一樣是關於Lipofectamine 2000的問題,
: 所以直接用原來的標題。
: 它給的protocol上面寫說,
: for plasmid transfection, high cell density (90-95%) to minimize cell death.
: 可是在RNA transfection 那邊,
: 寫說tranfection condition 的cell denisty是30-50% confluent。
: 為什麼一樣都是Lipofectamine 2000,
: RNA transfection 的時候只要30-50% confluent 就夠了,
: 可是plasmid 卻要90-95%才能 minimize cell death?
: 我試過大概70%以下就會死很多細胞,
: 如果是Lipofectamine的原因,那RNA transfection的時候,
: 細胞不是死光光了嘛?
: 為什麼RNA transfection就不用90-95% confluency
: 來 minimize cell death 呢?
我建議 如果要做RNAi transfection,建議用它新出的Lipofectamine RNAiMAX
因為第一:毒性低,第二:RNAi不需太多效果就很好
(我knockdown efficiency可達90%以上)
其實細胞多的話,transfection效果的確比較差!
p.s 我其實很不建議DNA transfection用lipofectamine 2000,毒性太強了!
Mirus TL1、transfast都比2000好,毒性低,效果不會比較差,也不會比較貴
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※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (04/02 02:17)
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推
06/06 18:20, , 1F
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