[問題]無法完全螯合His tag column 鎳離子
我在做完整個蛋白質純化後，最後以strip buffer (200mM EDTA)流洗
剛開始第一次使用column時可完全去除resin上之藍色鎳離子使最後resin上
呈現純白色。
但第二次使用後發現strip buffer無法完全去除藍色，
感覺還有些微鎳離子還結合在上面。
我有試過用3M NaOH 流洗 好像有少一點(不知道是心理作用還是真的)
不過還是無法像一開始用那樣呈現純白。
我charge buffer 的鎳離子是以NiSO4 配製的不知道有沒有差。
有誰跟我一樣情況或有任何解決方法的嗎?
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推
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