[問題] 我養的huvec有怪點點

看板Biotech作者 (三跪九扣三跪九叩)時間17年前 (2007/01/29 15:51), 編輯推噓8(8推 0噓 16→)
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http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0 正常 http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1 養的代數多了就會開始有點點 那些點點是什麼啊 一開始是一群一群數十顆 過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化 原本這細胞的代謝物就很多　但這些點點是貼盤的 多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長 我的細胞是primary culture　現在約八代　長得超慢 -- 1111111111111111111111116666661111199111111111111111111 11111111111111111111111688888891111911111111111111111111 1111111111111111111116888888888891111111111111111111111 1111111111111111111116888888888891111111111111111111111 1111111111111111161111168888889111111111111111111111111 1111111111111111661111199999911111111111111111111111111 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100
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細菌污染??
01/29 16:06, 1F
推
01/29 16:10, , 2F
還是血清的沉澱物...(有請其他高手解答吧 -_-)
01/29 16:10, 2F
推
01/29 17:00, , 3F
HUVECs不是只用三到七代嗎? 會不會是養太多代...我們家只用
01/29 17:00, 3F
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只用到第三代...還有我的 dish有額外 coating gelatin!
01/29 17:02, 4F
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我想請問細菌是不是會有布朗運動 因為點點是貼盤不動的
01/29 19:55, 5F
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且這些點點不太會"爆發",我一週SUBCULTURE一次
01/29 19:56, 6F
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01/29 22:03, , 7F
感覺類似細胞死掉以後的碎片 我的細胞也曾經這樣過 ~.~
01/29 22:03, 7F
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細菌污染，我之前就是這樣子
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或是黴菌，你的medium應該會很快變黃吧?!
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而且你的細胞不太純的樣子耶，細胞濃度也太低了，會長不好
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推
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fibroblast　SUBCULTURE　最好打成１顆顆的聚集成一片
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一開始就有一小片的話有些其實已經不是monolayer...
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那團非"monolayer"會整團漂起來．．．
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trypsin作用完後離心去除trypsin-medium mix後
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加入fresh new medium 打散細胞後靜置１分鐘讓非單顆的
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細胞沉下去 吸取suspension seeding 留下下面約3-5ml丟棄
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3-5小時後看細胞貼附的狀況有無細胞碎片決定要不要換
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medium...要污染３小時就夠了．．．
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BTW那些小點點　小弟覺得是污染...但是跟第一張的小黑點
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無關...因為第一張看起來像血清的沉澱物or apoptotic body
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但第２張是我常看到的污染...而且是跟動物有關的...
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因為小弟實驗室也是in vitro+in vivo...
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個人經驗僅供參考...但是有用的話麻煩跟小弟說一聲
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01/30 00:59, , 24F
因為最近也是被新來的弄得很煩..new comer=contamination?
01/30 00:59, 24F
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