Re: [問題] 請問pull down assay跟CO-IP的差別...
※ 引述《sezko (一般大學比較適合我)》之銘言:
: 請問一下這兩種方式的差別是什麼呢..??
: 是不是因為pull down assay並不是使用抗體所以才另外取一個名字的阿..??
: 兩者不都是觀察protein的interaction狀況嗎..??
: 還有pull down的專一性是否沒有CO-IP高呢..??
: 謝謝解答阿....拜託拜託.......
co-ip是用antibody與antigen的特異性來操作protein interaction的實驗,事實上
antibody的性質好壞與否,會決定實驗的品質與,甚至成敗……
-A protein Ab.-A protein-B protein
^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^
成敗的關鍵↑ ↑有興趣的protein
而pull down assay是將已知的protein做成fusion protein (ex.GST),利用enzyme-
substract的specificity來將已知的protein抓著固定,之後再與其他protein
interaction,所以嚴格說不會有上述的問題……
ex.
Glutathione-GST-A protein-B protein
^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^
↑Matrix ↑fusion protein ↑有興趣的protein
所以你要說這兩個方法那一個比較好,見人見智;因為這兩個方法都是Paper中,公認的
方法……
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