Re: [問題] SDS-PAGE跑膠 很多問
感謝各位前輩的回答
下面是我的狀況在詳述~
※ 引述《leondemon (狗狗)》之銘言：
: 目前問題:
: 1.我的marker完全沒有分層，可是我有放別人的marker，可以看到不同顏色的Band
: 是不是我的marker有問題，還是我買錯了?(什麼是prestained marker)
看來我的marker應該不是pre-stained的
要找sales換了
: 2.第一次製膠時，感覺膠體作的不是很好，雖然膠片有凝結，但是tube內的沒有
: 後來跟別人借Acry/Bis來重新配，也用自己的Acry/Bis配一管，兩管都有凝在Tube
: 但是感覺我的凝膠表面不是水平狀，但是別人的Acry/Bis配的，表面很平
我是泡兩管在tube內，然後靜靜的站在架子上~
結果用別人acry/bis泡的 比較快凝 而且表面是平整的
我的acry/bis泡的 稍慢一點點 而且表面有點像 攪拌過的布丁 凹凸不平(只有表面喔~)
另外~跑0.75mm厚的膠
APS和TEMED的量 怎麼樣比較合適呢??
: 3.在stacking時，每條lane的dye都會越來越胖，
: 隨著時間流逝，別人家的marker，band呈梯形狀，這樣正常嗎?
就是我用別人家的pre-stained marker，他的ladder跑越遠越寬，感覺都到隔壁家去了
要注意哪些事情 才能讓PAGE跑的漂亮呢??
另外，似乎有染劑可以先染membrane(我是用PVDF)看結果，然後再後續的抗體反應
有沒有關於預染這方面的做法和相關要注意的事項呢?
還是感謝各位先進的解答了~
※ 編輯: leondemon 來自: 61.229.161.23 (09/17 03:01)
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