protein無法induce

看板Biotech作者時間18年前 (2006/08/03 13:22), 編輯推噓6(603)
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我使用pGEX-KG來產GST fusion protein sequence出來的結果是正確的 但是在SDS-PAGE上沒有IPTG induction的痕跡 不死心的用western blotting check 可以偵測到GST和我的protein的signal 有沒有人知道為什麼 要怎麼解決? 拜託知道的人解答一下 感激不盡!! -- Origin: 中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw Author: chianny 210.241.43.125 發表

08/03 17:01, , 1F
protein express濃度不夠吧. 可能要抓IPTG誘導最適條件.
08/03 17:01, 1F

08/03 18:32, , 2F
PAGE和western的靈敏度差很多吧!!
08/03 18:32, 2F

08/03 18:34, , 3F
你的蛋白質量應該非常少吧~~~
08/03 18:34, 3F

08/03 19:20, , 4F
可以用銀染試看看呀
08/03 19:20, 4F

08/03 23:28, , 5F
你做WB是用supernatant或是全細胞 cell lysate去做?
08/03 23:28, 5F

08/04 14:48, , 6F
western跑的出來銀染應該也沒問題 要在page上看到band
08/04 14:48, 6F

08/04 14:49, , 7F
可以試試看把medium拿去濃縮
08/04 14:49, 7F

08/05 01:41, , 8F
銀染的威力大概在1-10ng,但western可以衝到1-10pg
08/05 01:41, 8F

08/05 15:14, , 9F
若要用銀染或western blot才看的到蛋白質,那有做的價值嗎?
08/05 15:14, 9F
文章代碼(AID): #14qOWj00 (Biotech)
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