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作者 mattmatt 在 PTT 全部看板的留言(推文), 共1262則

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[問題] 超微量分光光度計的操作與維護

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +7

作者: sabulo - 發表於 2011/01/27 23:00(15年前)

2^F推mattmatt:我們家的也只拿來測核酸廠商是說蛋白比核酸有機會黏住01/28 05:49

3^F→mattmatt:已經用了三四年耗材只有拭鏡紙每月用量可能超過500次01/28 05:51

4^F→mattmatt:目前定量還算準確純化後的核酸定都滿準的01/28 05:53

5^F→mattmatt:LED光源就是波長固定沒法定全波長但只定核酸應該也ok01/28 05:55

6^F→mattmatt:電動馬達和電磁鐵設計不同而已不太影響廠商勤快點才是01/28 05:57

7^F→mattmatt:至於連續測 sample-sample之間會不會汙染的問題01/28 05:58

8^F→mattmatt:我們都會用ddH2O當成control 測完一個sample 擦拭乾淨01/28 05:59

9^F→mattmatt:再測ddH2O 結果都還滿乾淨的不會有sample殘留問題01/28 06:00

10^F→mattmatt:蛋白就容易有殘留的可能可能要頻估一下要不要測蛋白01/28 06:01

11^F→mattmatt:校正的話廠商一年大概來看一次沒甚麼特別問題也沒校正01/28 06:03

[求救] protein purification

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +2

作者: Marriott - 發表於 2011/01/22 21:06(15年前)

5^F推mattmatt:跑一塊native PAGE和SDS PAGE 看western能不能測到his01/23 04:30

6^F→mattmatt:我的case 100mM imidazole就會洗下來 200mM以上洗光光01/23 04:32

7^F→mattmatt:buffer是用Tris-Cl和NaH2PO4 pH8 感覺buffer影響較小01/23 04:33

8^F→mattmatt:可能還要測一下Ni-NTA agarose binding後flow過去的extra01/23 04:35

Re: [求救] 菌長出來裡面什麼都沒有

[ Biotech ]31 留言, 推噓總分: +13

作者: waitingu - 發表於 2011/01/21 18:02(15年前)

12^F推mattmatt:視抗生素的作用和何種菌還有titer 每一種菌(細菌/真菌)01/22 18:43

13^F→mattmatt:能耐受的抗生素種類不同劑量也不同01/22 18:43

14^F→mattmatt:要是對菌沒作用的話 stock的濃度也殺不死01/22 18:44

15^F→mattmatt:所以才有所謂超級細菌萬古黴素都殺不死的那種...01/22 18:45

[討論] oligo/primer的blast工具演算方法

[ Biotech ]21 留言, 推噓總分: +4

作者: FDynasty - 發表於 2011/01/21 16:07(15年前)

3^F推mattmatt:當然不會找到具有gap的結果...因為你用的是BLAST01/22 02:01

4^F→mattmatt:BLAST:Basic "Local Alignment" Search Tool01/22 02:02

5^F→mattmatt:他只做local alignment搜尋並不會加gap進去找01/22 02:03

6^F→mattmatt:你講的下面加入gap的叫做global alignmnet01/22 02:04

7^F→mattmatt:兩個是不同的方法結果呈現和運算速度都有差01/22 02:04

8^F推mattmatt:就像你說的 local只針對相同或相似的片段做搜尋01/22 02:10

9^F→mattmatt:global則是會加入gap使序列長度一至後再尋找可能的排列01/22 02:10

10^F→mattmatt:global通常用在multiple sequence alignment 以多條序列01/22 02:11

11^F→mattmatt:的資訊組合出最有可能的排列方式01/22 02:12

12^F→mattmatt:但NCBI資料庫序列有幾千萬條還要應付全世界的人的使用01/22 02:13

13^F→mattmatt:若是用一條序列要求global的方法幾台超級電腦都不夠算01/22 02:13

[求救] real time PCR standard curve之建立

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +1

作者: myrhino - 發表於 2011/01/13 10:28(15年前)

1^F推mattmatt:RT反應完後cDNA有稀釋過嗎? 有些RT buffer會抑制PCR反應01/13 16:55

2^F→mattmatt:另外DNase處理完的RNA直接上機可以跑?!?!?!01/13 16:55

3^F→mattmatt:要嘛就是DNA殘留...要嘛就是你們家酵素相當厲害...01/13 16:56

4^F→mattmatt:最後..不知你們的設計為何需要絕對定量..一般看基因表現01/13 16:58

5^F→mattmatt:大多使用house keeping gene去做相對定量..01/13 16:58

6^F→mattmatt:印象中mRNA要做絕對定量來計算轉錄量還滿不容易的...01/13 17:00

[問題] 洗力泡去哪了?

[ DailyArticle ]2 留言, 推噓總分: 0

作者: mattmatt - 發表於 2011/01/13 01:16(15年前)

2^F→mattmatt:pchome只有地板用的...浴室用的永遠缺貨01/16 01:08

[求救] 以calcoflour染cellulose

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +2

作者: mournermind - 發表於 2011/01/10 23:09(15年前)

1^F推mattmatt:calcofluor white Excitation 365-440 Emission 435-52001/11 10:27

2^F→mattmatt:不知道你的calcoflour是買哪一種但激發和散出很接近01/11 10:28

3^F→mattmatt:不用濾鏡(顯微鏡) 散出光容易被其他波長蓋掉01/11 10:31

4^F推mattmatt:況且藍紫光較其他顏色弱可見光會蓋過一般相機拍不起來01/11 10:34

5^F→mattmatt:陽春一點就是幫相機買率鏡留下435-520的波長也許可以拍01/11 10:35

6^F→mattmatt:看你買的calcofluor適合哪個波長的濾鏡01/11 10:36

[問題] 不同的熱身？

[ Volleyball ]38 留言, 推噓總分: +11

作者: bluerain0958 - 發表於 2011/01/05 21:53(15年前)

7^F推mattmatt:我想"暖"跟"開"是兩回事...01/05 23:27

8^F→mattmatt:先是身體肌肉關節伸展拉開(拉筋) 這大家一起做比較方便01/05 23:28

9^F→mattmatt:再來是讓血液熱起來&流到肌肉裡(暖身) 這因個人體質而異01/05 23:29

10^F→mattmatt:有暖沒開和有開沒暖都不太好建議照標準程序進行01/05 23:31

11^F→mattmatt:再依個人條件調整每個動作的強度&次數01/05 23:32

膠乾在UV BOX裡面怎辦

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +8

作者: sun0109 - 發表於 2010/12/31 18:13(15年前)

4^F推mattmatt:拿吸滿水的一疊擦手紙蓋在上面吧...一直加水到泡軟為止01/01 03:36

[求救] real time PCR

[ Biotech ]11 留言, 推噓總分: +3

作者: enicole - 發表於 2010/12/30 22:53(15年前)

1^F推mattmatt:1.兩者放相同量的DNA下去各別的kit內按照建議設定12/31 04:16

2^F→mattmatt:比較cp 沒差很多的話就沒甚麼問題相對定量的話影響不大12/31 04:17

3^F→mattmatt:2.目測同樣大小的band很難說是相同序列序列的不同也會讓12/31 04:20

4^F→mattmatt:Tm值有差..有可能P到base差幾個的片段 single copy gene?12/31 04:22

5^F→mattmatt:有沒有不同alle的可能? 或者用3%的agarose去試著跑開看看12/31 04:24

6^F→mattmatt:3.端看你的產物大小和GC% 沒有絕對值 peak溫度越集中越好12/31 04:26

7^F→mattmatt:4.膠膜問題多多,表面多少不太平整還是tube比較穩定一點12/31 04:28

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