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作者 mattmatt 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共275則

限定看板：Biotech

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Biological replicates的定義?

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: 0

作者: WilliamF - 發表於 2010/09/11 00:39(15年前)

1^F→mattmatt:三次相同條件的樣本處理所得到的RNA.轉成的三批cDNA09/11 03:38

2^F→mattmatt:當然qPCR的話是每個cDNA vs Primer都要三重複求平均09/11 03:40

[求救] 想請問random primer 跑PCR的條件 ~(>< 急)

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +3

作者: lacrimal0710 - 發表於 2010/09/11 00:10(15年前)

2^F推mattmatt:之前做6base randam primer PCR設在40~45之間,usually 4209/11 03:34

3^F→mattmatt:但那是for RAPD,病毒不大的話不如直接定序...09/11 03:37

7^F推mattmatt:限制酵素或PCR處理 clone起來再做primer walking定序09/12 03:33

[問題]PCR cleanup kit廠牌

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +2

作者: petcj - 發表於 2010/09/10 14:42(15年前)

2^F→mattmatt:GE的illustra GFX,solution&gel同一套解決方便快速09/11 03:43

3^F→mattmatt:10分鐘做完全部,gel約15分(多融膠一步)...缺點是貴囧09/11 03:44

[求救] 請問台南pH meter的校正buffer哪裡買?

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +5

作者: agene - 發表於 2010/08/27 00:59(15年前)

9^F推mattmatt:phosphate buffer有pH參照表照著配就可以得到特定pH08/28 04:03

10^F→mattmatt:不需再測pH 配好也無法再調pH 當然這是理論...08/28 04:04

11^F→mattmatt:google phosphate buffer就可找到不同pH配方08/28 04:05

[求救]脈衝式電泳(PFGE)

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +1

作者: duts - 發表於 2010/08/19 20:56(15年前)

1^F→mattmatt:說明一下你跑的sample是甚麼如何製備的會比較好....08/19 21:21

[求救] cloning

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +8

作者: iwenyo2 - 發表於 2010/08/17 20:07(15年前)

9^F推mattmatt:同上 plasmid PCR只需1 ng以下的template..08/19 21:14

10^F→mattmatt:高於100ng就很有機會在膠上看到plasmid本身定個量吧~08/19 21:15

[求救] 寄DNA sample 到米國

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +4

作者: IwgboU - 發表於 2010/08/16 18:00(15年前)

16^F推mattmatt:酒精沉澱後dry乾常溫寄沒問題...點在濾紙上也沒問題08/19 21:18

17^F→mattmatt:如果genome是要拿去PCR的話這些方法應該都OK08/19 21:19

[求救] OD值=菌量與DNA量?

[ Biotech ]7 留言, 推噓總分: +5

作者: jimmy20077 - 發表於 2010/08/09 15:02(15年前)

6^F推mattmatt:丟個10ulXbaI下去再說XD(誤!) 老闆會很恨你....08/09 18:50

[求救] cloning實驗做到digest gelpurificatio …

[ Biotech ]45 留言, 推噓總分: +4

作者: honeytea96 - 發表於 2010/08/08 00:58(15年前)

22^F推mattmatt:PCR效率看起來頗差..直接P genomic DNA嗎?template量?08/09 02:24

23^F→mattmatt:看能不能想辦法P多一點...但還是建議gryou大說的,08/09 02:25

24^F→mattmatt:先用TA cloning,放大片段再下去切,量多又純又可定序08/09 02:27

25^F→mattmatt:你的方法一開始PCR產物量就少了而過一次純化kit會少50%08/09 02:28

26^F→mattmatt:kit只用12ul elute雖然濃度會高一點但elute的總量會更少08/09 02:28

29^F→mattmatt:最後就會少到無法做後續08/09 02:30

30^F→mattmatt:可以PCR多個五六管一起load膠做Gel purification08/09 02:31

31^F→mattmatt:elute用35~40左右然後直接digestion 但ligation可能不08/09 02:32

33^F→mattmatt:適合RE的酵素還是純化比較好 (但量又會更少囧)08/09 02:33

[求救] Vector only 的 control 比 vector + i …

[ Biotech ]55 留言, 推噓總分: +12

作者: boblu - 發表於 2010/08/06 22:34(15年前)

7^F推mattmatt:請問double digest時間多久? 以及plasmid和RE的量?08/07 04:21

8^F→mattmatt:ligation的溫度?08/07 04:24

19^F推mattmatt:4ug 1uL RE切4小時有點不太夠..會有不完全切完的可能..08/07 17:59

20^F→mattmatt:減少plasmid的量&增加切的時間再試試看吧...切ON試試?08/07 18:01

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