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作者 gps0110 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共65則

限定看板：Biotech

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[求救] lysis buffer是否要含imidazole

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +4

作者: bill00202000 - 發表於 2015/03/21 21:01(9年前)

1^F推gps0110: 少量的imidazole是要減少non-specific binding03/21 23:17

2^F推gps0110: 你target protein的表現量高嗎？如果只有一點點可能都被03/21 23:19

3^F→gps0110: 你lysis buffer中的imidazole compete掉了03/21 23:19

[求救] 96well孔盤產生的氣泡

[ Biotech ]13 留言, 推噓總分: +6

作者: Kraft - 發表於 2015/03/13 20:22(9年前)

8^F推gps0110: reverse pipetting+103/15 00:41

[討論] 數完細胞後如何種細胞?

[ Biotech ]18 留言, 推噓總分: +8

作者: chaichi - 發表於 2015/03/12 22:14(9年前)

3^F推gps0110: 你要種500000的final volume是多少03/13 00:42

4^F推gps0110: 用5cc沖散的那些細胞濃度就是1500000cells/ml03/13 00:44

5^F推gps0110: 最簡單就是你把那5cc dilute3倍(就是再加10cc media) 混03/13 00:48

6^F→gps0110: 均勻之後取這其中1cc裡面就有你要的500000個細胞03/13 00:48

8^F推gps0110: 那你可以拿1ml的5cc dilute3倍的溶液到6cm dish03/13 05:46

9^F→gps0110: 再用無細胞的media補到夠cover整個well的volume就可以了03/13 05:46

13^F推gps0110: 300應該是筆誤吧XD 不過這樣變成要dilute 5倍03/13 18:19

Western band定量出的ratio不穩定（再現性差）

[ Biotech ]31 留言, 推噓總分: +8

作者: snow122 - 發表於 2015/02/02 21:59(9年前)

25^F推gps0110: 如果你用相對量做elisa也不一定要絕對定量？02/02 23:26

26^F推gps0110: 另外借問一下有沒有人用96 well的sample lysate去做elisa02/02 23:28

27^F→gps0110: ? 試著做過但是s/n值好低不知道是因為不是commercial ki02/02 23:28

28^F→gps0110: t還是純粹sample太少02/02 23:28

Re: [閒聊] mammalian cell lysis

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +4

作者: iMed - 發表於 2015/01/13 06:20(9年前)

1^F推gps0110: 我做wb會用urea sds 收可以用很小的volume01/13 08:03

2^F推gps0110: 不過用urea收不太好定量就是了01/13 08:05

3^F推gps0110: 白白稠稠的應該是 genomic DNA 除了sonication可以加點DN01/13 08:18

4^F→gps0110: ASE01/13 08:18

[求救] 維持DMSO濃度0.1%,改變食材濃度的計算?

[ Biotech ]21 留言, 推噓總分: +9

作者: grassshan - 發表於 2015/01/08 18:30(9年前)

10^F推gps0110: 你用來溶藥物solvent(DMSO)的final concentration(0.1%)01/09 19:04

11^F→gps0110: 比藥物的final concentration(1%)低01/09 19:04

12^F→gps0110: 除非你的藥物只要加了1/10的DMSO就可以幫助其溶解在水裡01/09 19:06

13^F→gps0110: 不然好像沒法達成01/09 19:06

14^F推gps0110: 要配0.1%DMSO 1%藥基本上就是在final volume 1000裡面加01/09 19:08

15^F→gps0110: 1的DMSO還有10的藥01/09 19:08

16^F推gps0110: 或者你可以先配0.1%DMSO的solution(in water) 然後直接01/09 19:11

17^F→gps0110: 看苯乙醛能不能溶進去01/09 19:11

18^F推gps0110: 否則就要提高DMSO的濃度了01/09 19:13

[求救] Real-time PCR的PCR efficiency~

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +6

作者: hsin37 - 發表於 2014/11/20 19:37(9年前)

12^F推gps0110: 借這篇問一下如果用ddCt法做relative quantification的12/04 01:57

13^F→gps0110: 話需要每盤都有housekeeping gene嗎？sample很多一盤12/04 01:57

14^F→gps0110: 放不下每盤都要housekeeping gene的話要做的量一下子多12/04 01:57

15^F→gps0110: 好多12/04 01:57

[求救] 凍MCF10A細胞

[ Biotech ]19 留言, 推噓總分: +8

作者: shinchenboy - 發表於 2014/09/06 13:38(9年前)

2^F推gps0110: 加FBS09/06 18:25

[求救] L-glutamate medium 配置方法消失

[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +2

作者: MoMo123 - 發表於 2014/08/20 16:22(9年前)

9^F推gps0110: 我們實驗室都買sigma已經配好的溶液08/21 06:37

10^F推gps0110: sigma g7513 l-glutamine solution 200mM08/21 06:41

[問題] western blot 跑膠疑問

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +5

作者: hahabighan - 發表於 2014/08/11 15:22(10年前)

9^F推gps0110: 2相反08/12 15:37

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