[討論][細胞酵素][習題解答]第五章第一題
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His 的 imidazole group 的 pKa = 7.35
mech 要分別討論 acid catalysis 和 basic catalysis
不管是酸還是鹼催化
第一步都是速率決定步驟
酸: C=O:要抓 imidazole N 上的 H
鹼: imidazole 的 N: 抓 水的 H
水的 O 上的 LP(lone pair) 攻 C=O 上的 C
為什麼推測主要是靠 His?
1.chymotrypsin active site 有 His
2.His 的 imidazole group pKa 接近 7
而 chymotrypsin 能在中性條件作用
3.imidazole 接受 proton 的速率高，半衰期小於 10^-10 sec
題目中提到：
根據動力學的研究，有兩相特徵：
1.burst phase:水解產物(對硝基苯酚離子)快速形成，並與 enzyme 的量成正比。
2.steady phase:水解產物以較慢但恒定的速率形成，速率與受質濃度無關。
此反映實際上是一個兩步連續反應。
第一階段，E S 快速結合並作用，並釋出對硝基苯酚離子，同時形成共價結合的
acyl-enzyme intermediate
第二階段，acyl-enzyme 慢速 hydrolysis，釋出 acyl-group
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