[轉錄]Re: [問題] 遺傳實驗的問題...
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作者: ponyo (反省吧) 看板: NTUmed91work
標題: Re: [問題] 遺傳實驗的問題...
時間: Sun Jan 5 19:00:42 2003
※ 引述《sammil (建造雨林)》之銘言：
: ※ 引述《chanyang (數羊..數小太陽:*)》之銘言：
: : Solution 1: 把細菌打散
: : Tris-Cl:緩衝液
: : EDTA:抓住2+ cation(2+ cation is a coenzyme)
: : Solution 2:lyse the germs
: : 0.2N NaOH: 將所有物質溶解
: : SDS:break cell membrane
: : Solution 3:
: : 5M potassium acetate:沉澱SDS 把 ***(?) (字太亂看不懂ㄌ) 請補充!!
: ***(?)應該是使protein和lipid形成穩定的錯合物
我們班的助教是說，鉀離子會取代SDS中的鈉離子
使SDS（不知被取代後還叫不叫SDS）容易沈澱
: : 冰醋酸:中和溶液 使大部分沉澱 except plasmid
(中和NaOH)
加了solution2後細菌被打了許多洞，我們要的plasmid就會流出
但是較大的genomic DNA應該還留在菌體內
加入solution3把NaOH中和，把SDS除掉
還有接下來的離心除去菌體殘渣（本來還有一步加phenol,chloroform以除去蛋白和脂質）
這樣應該就很乾淨了...除了plasmid應該只有一些RNA而已
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挖戰壕捉蚯蚓奮勉向上更加向上
聽槍聲如溪流勤種地瓜也吃地瓜
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搖一柄桂槳，邀你溫情河裡泛舟
你可願意？
河是深了點，但那是思念溪彙成的河流
真愛沉不了
何況還有我深情的雙眸相擁你左右
你還在忐忑？
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