[公告] 關於細菌實驗 "agarose gel electroph …
我是細菌學實驗助教
上次有點混亂...所以有些鼕鼕好像沒跟大家說得很清楚...
在此先跟學弟妹說一聲抱歉~~
如果實驗上有任何問題...歡迎隨時來實驗室問我或是老師...
關於電泳跑出來的結果...
已經由你們班同學張貼於209...
本來是打算讓你們自行影印...但有學弟妹反應影印效果不佳...
所以需要解析度好一點的話...可以到實驗室來列印檔案...
恩...接下來稍微解說一下跑出來的pattern...
大家應該都已經知道marker DNA的作用了吧...(不知道的再發問好了...^^|||)
我已經將各ladder所表示的size大小 (單位: kb) 標在張貼的某一張...
大家可以自行比對...
gDNA跑出來的結果，應該在大於10kb的地方會有一團
而本次實驗所採用的plasmid DNA大小約4.5kb左右...
而plasmid上只有一個EcoRI的切位...
所以用EcoRI切過之後...將呈linear form...跑出來的pattern應該就是4.5kb左右
如果比4.5kb大的地方有其他雜band的出現...可能原因:
gDNA的污染
EcoRI作用未完全
等等...(大家可以自行在查資料，做推測...老師喜歡用功的小孩唷...^^|||)
至於uncut的plasmid...
可能會在大於4.5kb的地方出現雜band...原因和上述相仿...
另外...也可能導致於plasmid DNA的conformation...
若呈supercoiled form時...將比預期大小要小...
若呈cirular form時...將比預期大小要大...
至於大家在gel上看見拖尾的亮帶部分...是RNA...
因為我們實驗過程中並未處理RNase...
恩...大概就是這樣吧...
如果有想到什麼再補充...
有疑問的...再來實驗室問吧~~
恩恩~~:)
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