森林生物技術概論---酵素技術
◎酵素(Enzyme)技術
酵素具「催化」作用,是一種「蛋白質」
細胞最後在「酵素袋」分解
CO2 + H離子+OH離子 --> HCO3離子 + H離子
酵素催化要有特定(特異性,專一性)的「基質」
eg:D form 的酵素無法作用在L form 的物質上
作用形式
1. Key-lock
2. induced fit
用酵素做化學反應---特異,專一性
A+B --> C+D
因子:壓力,溫度,濃度
各因子愈大,反應的速度愈快
酵素技術的缺點
1. 酵素是一種蛋白質->安定性不好 (pH,溫度,環境因子皆會影響)
->必須提高其安定性
->去除不安定因子
方法:
(1) 製造新的酵素(蛋白質工程)
(2) 「固定化」處理
(3) 微生物
※固定化 酵素+高分子物質 (將酵素固定起來,反應的碰撞機會較大)
-物理方法:包埋:將酵素包起來保護其active site
-化學方法:較會破壞active site
-生物方法
-優點:可重複使用
-缺點:酵素活性不會比固定前高(重複使用活性降低)
2. 價格不便宜
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(網路資料)
固定化酵素
除了以蛋白質工程的方法可以改善酵素的品質外,把酵素固定起來,也有增加酵素
-安定性
-耐熱性
-可重複使用 的特性。
固定酵素的方法很多,可以用
-化學鍵結,把酵素連到某一固相物體;也可以用
-物理的區隔方法,把酵素限制在某一區域內。
固定化酵素可以做成大規模反應槽,讓基質通過反應槽後,即可收穫產物;若此反應
器中,含有某一代謝路徑中連續反應的酵素群,則可模擬細胞內的連續催化路徑,產
生更有學術或經濟價值的產物。
若把酵素固定化在薄膜上,則還可有一個重要應用,就是做成以酵素反應為基礎的檢驗
電極,得以快速檢驗大量樣本。
另外,酵素的固定化,也是將來蛋白質或酵素晶片的第一步,預期會有無窮的應用潛力。
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蛋白質工程
1. 20種aaa polypeptide
2. flexibility 柔軟度重要 (因為:要和基質結合) 第一二三級結構--folding
3. aa:親水性&疏水性
4.
DNA --> mRNA --> protein
Structure --> property --> function
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(網路資料)
蛋白質工程
酵素是一種蛋白質,而蛋白質是由胺基酸所連接而成的長鏈,折疊成一定的形狀,
以便進行各種活性或功能;若改變酵素的胺基酸序列,就有可能改變該酵素的活性
或其他性質。
蛋白質工程就是以遺傳工程的手法,把該酵素的基因群殖出來,改變基因上面的某
核酸密碼,就可改變所表現蛋白質的胺基酸序列。經過如此改變的酵素,通常不可
能增加其活性,因為大部分酵素經過億萬年的演化,已經是最佳的狀況;通常是修
改某胺基酸之後,發現該酵素活性下降或完全失活,就知道該胺基酸很重要。
因此,蛋白質工程多用來
-增加酵素的安定性
-改變其催化反應條件
-改變酵素對不同基質的親和程度
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