[閒聊] 上完一門暑修課的心得
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預計明天結束,為期17天的生物技術實驗課程,在剛剛提前結束XD
老師為了讓大家安心躲颱風,昨天開始狂趕實驗進度,
基因槍10連發,打到那些赤裸裸的果蠅卵漫天哀號...
(被氣壓450psi送出去的金粒子打到感覺很痛= =)
===============前言結束==================
其實心得很多很雜,
所以只挑印象最深的出來喇勒...有說錯的麻煩請"鞭",謝謝^^
我們最後一個梯次的課程,主題圍繞著RNAi (RNA interference)打轉。
【RNAi洗蝦密?】
簡單的說,就是利用約21-23bps的短片段dsRNA中的antisense strand與mRNA互補特性,
去辨識mRNA的特定位置,並帶著RISC(複合蛋白質)結合上去形成部分雙股的情形。
通常依雙股的pairing情形使mRNA走向不同命運:
完全base-pairing(完全match)→通常導致mRNA水解。
[通常小片段dsRNA來源為siRNA (small-interfering RNA),由外送入]
不完全base-pairing(幾個base不合)→通常只會調控該mRNA的轉譯,減少蛋白質產生。
[通常小片段dsRNA來源為miRNA (micro RNA),細胞內源性,自身產生]
(印象中,阿忠老師的病毒學有提到RISC,因為對病毒禦機制也跟這有點關係的樣子)
最早的RNAi機制被發現,是1990年,
由 R Jorgensen 等人在《Plant Cell》發表的一篇關於牽牛花花色基因的研究。
他們在藍紫色牽牛花的基因中,加入更多copy number紫色基因,從而希望得紫到發黑的
新品種黑色牽牛花。牽牛花開出來了...不過卻是意外的白色!
他們也因此提出一個概念:Post-Transcriptional Gene Silencing (PTGS)
推測是某種共同抑制作用將原有的內源性與外來基因都被silence了。
【RNAi能做什麼?】
其實看了上面的描述,就可以發現RNAi的目的是調控mRNA轉譯作用,甚至直接宰了他!
換句話說,就是降低基因的表現量!
今天請到中研院的鄭博士來上課,舉了兩個例子:
第一個
是國外利用siRNA的注入,來抑制眼球中過度增生的血管,治療了視力受影響的婦人。
另一個
是關於肝硬化初期治療,不過實驗對象還在老鼠。主要是將siRNA與Vit.A作連結,
使肝臟的Hepatic stellate(HS) cell透過Retinol binding protein(RBP) receptor
對Vit.A的吸收,將siRNA送入HS cell內,抑制肝臟纖維化的表現,以阻止肝硬化。
【Knock-down & Knock-out 的比較?】
我去推甄的時候被問到這個= =
應該很重要,有學弟妹看到要注意阿!
knock-down:
藉由調控mRNA等,使表現量下降,讓基因表現不完全。但最基本遺傳物質DNA並不受影響。
上述提到的RNAi就屬此類。
knock-out:
藉由操弄DNA,make the gene "null"(無效)!!
如施以突變因子,始之發生deletion等破壞基因表現之突變。
或直接將該基因直接剔除之。
這些方法都可以使基因完全不表現,但是都會改變DNA序列!
==================踩煞車分隔線=====================
不小心講了一堆,因為上完這一梯次的課讓我感觸很深。
很多人都說RNAi這類技術正開始蓬勃發展,
一部分原因也是最基礎的分生與基因解碼都到了一個水平,
所以開始朝這塊看似無窮潛力的神秘地帶研究,
畢竟這麼小片段的RNA在早期很容易被忽略,
所以現在人們對他有越來越多的興趣。
尤其看到上面提到治療肝硬化的例子,雖然是針對早期治療,而且大部分是在治標,但是
真的讓人覺得有很多發展空間呢!
話說回來,這些也不是多新的技術,只是這幾天才剛剛認識,
所以很興奮的想跟大家分享。
(好啦~好啦~不說了^^)
祝
在學的研究之路順利!
打算就業的能夠闖出一片天空!
如果有想婚的,那先祝你/妳們永浴愛河XD
最後,都要身體健康啊!!
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