[請益] 請問有人在做中草藥關於美白檢測實驗嗎?
不知道適合在這邊問嗎?
有人在做關於中草藥抑制酪胺酸脢的實驗嗎?
我一直做失敗~(條件都一樣,PBS也設定成一倍,酵素也溶在PBS裡)
能注意的地方目前應該都有注意到~希望有經驗的前輩能給予指導感恩!!!
補充實驗的條件內容:
處理組(萃取液)(B):萃取液100ul,磷酸緩衝溶液90ul,
0.03%酪胺酸溶液100μl, 酪胺酸脢水溶液10μl。
空白組(Bo):100ul,磷酸緩衝溶液190μl,酪胺酸脢水溶液10μl。
對照組(A)：步驟與處理組相同，但以等體積的萃取液所使用的溶劑取代萃取液。
總體積共300μl:(因用水萃,故此時使用Ro水)Ro water 100μl,磷酸緩衝溶液90ul,0.03%
酪胺酸溶液100μl, 酪胺酸脢水溶液10μl。
總空白組(Ao):
步驟與處理組相同，但以等體積的萃取液所使用的溶劑取代萃取液，以等體積的磷酸緩衝
溶液取代酪胺酸脢溶液。
總體積共300μl:(因用水萃,故此時使用Ro水)Ro water 100μl,磷酸緩衝溶液190μl, 酪
胺酸脢水溶液10μl。
先於96-well中混和，並置於37℃培養箱中10mins，
再加入10μl的酪胺酸脢水溶液，將溶液混和均勻，置於37℃培養箱中反應25mins，
以紫外光光譜儀測定475 nm時的吸收值。
流程方式如上~可是測出來的清除率總是波動很大,正好幾百到負好幾百都有><
不知道是哪邊沒有注意到嗎?(酵素方面?PBS方面?)或者是哪兒是沒有去顧慮到的呢?
謝謝!!
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