[實驗] 請問關於HPLC跑鹽類跟清洗的問題
大家好
小弟我最近實驗室要接手操作HPLC
用的移動相是磷酸buffer87%+ACN
管柱是C18
但跑出來的peak因為管柱老化開始嚴重拖尾而且與其它peak黏在一起(之前看學長跑的不
會)
主要是想問幾個問題
爬了很多文 有的人說鹽類跟ACN絕對不能碰在一起
但又有人說這種跑法很常見
結束後用高水相沖洗就可
所以不曉得到底適不適合這樣做
因為目前的program是跑完15分鐘後
會把ACN調到85%
最後會再調到100%沖提
如果會結晶的話是不是每跑一次就虐待管柱一次
目前舊的管柱已用半年
平衡時壓力據說是剛換時的三倍(900升到2700psi)
我接手後已經搞了一個月
甲醇 水 ACN 各種濃度 流速 梯度去洗都試過了
最後還是逆洗 壓力降到1800
但peak還是分不開
老師一直覺得是我們操作問題不願意換管柱
主要還是想問前輩們如果換了新管柱
要怎麼保護避免他那麼快掛掉
謝謝
--
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