[實驗] Aldehyde-Hydrazide 產物對熱的穩定度
各位先進大家好，最近研究欲利用 aldehyde-hydrazide 反應修飾3'端RNA，簡易步驟如下：
1. 用sodium periodate將3'端相鄰OH基氧化成aldehyde
2. size-exclusion column分離出RNA
3. 加入hydrazide-cy3(cyanine dye)與RNA反應
4. 用sodium cyanoborohydride將hydrazone還原成單鍵
5. 乙醇沉澱後測HPLC
想請教此反應產物對熱的穩定度如何，由於實驗需求將RNＡ加熱至70度，再測HPLC時發現dye脫落了(約1-2小時完全與RNA分離)。
目前已知hydrazone在高溫(> 40)的穩定度不佳，但重複實驗、也試過不同步驟結果仍相同。因此想借助各位對化學鍵的敏銳度，看看是否產物的穩定度是否足以承受高溫。謝謝。
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