[實驗] Agilent 1100 nano HPLC 測試問題
各位化學前輩們好
小弟我是師大化學分析組的碩班學生
目前實驗室是液相層析搭配質譜儀的領域
小弟我負責的儀器是Agilent 1100 nano pump
由於是做蛋白質體學領域的研究
因此使用的HPLC與管柱都是nano等級的
比較特別的是我們實驗室的毛細管管柱都是自己packing的 C18管柱 3um
小弟目前遇到的問題是這樣的 這問題糾結了半年之餘 實在摸不著頭緒才來這邊請教：
學理上而言
HPLC流動相為水相(H2O)時 壓力會較高
流動相為有機相時（ACN) 壓力會相對較低
因此當沖提方式為梯度沖提時
壓力的走向基本上要與梯度走向相反才是
但是小弟接上自己packing的管柱測試
使用的流速為0.3uL/min
系統的壓力隨著有機相梯度的拉升也跟著拉升
100%水相大約120bar 100%有機相來到約180bar
為了確認不是儀器本身的問題
小弟有借來一支市售管柱做測試 0.5mmx150mm 流速開到20uL/min
梯度壓力非常正常 水相70bar 有機相20bar
鬼打牆的是為何自己的管柱就行不通
材質粒徑都一樣只是內徑不同
更神奇的是這是實驗室的技術 歷屆學長姐都是用這個方法做實驗
怎麼到我這就問題連連
想請教各位化學人幫忙集思廣益找出小弟實驗的盲點
謝謝指教！
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 175.96.65.96
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Chemistry/M.1492696099.A.9B3.html
→
04/21 07:31, , 1F
04/21 07:31, 1F
→
04/21 07:31, , 2F
04/21 07:31, 2F