［請益］uv-vis定量問題

看板Chemistry作者 (回家吧)時間8年前 (2016/06/21 13:58), 編輯推噓3(3推 0噓 101→)
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各位好 本小魯做實驗時，需用特定波長的uv吸收度來定量其中所含的金屬離子的量。 一直以來都是以積分面積來算其濃度為何。（指導教授不清楚uv的理論） 但近日來，被一位中部國立中字輩的學長告知我的定量方法是錯的！ 此學長，說吸收度即為濃度！而且他大學的儀器分析也是這樣教！ 若按照學長的說法，我的實驗將會出錯 故來此請教uv-vis 定量的問題。 謝謝 手機發文！若有排板不好！敬請諒解！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.14.48.88 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Chemistry/M.1466488685.A.4CE.html
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06/21 14:09, , 1F
不如把你定量的方法說來聽聽?
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先配置1M的硫酸當reference ,先測量1000ppm的標準品。
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此標準品會在312nm有一個峰值出現，積分此峰面積並訂
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此總面積為1000ppm.再將此標準品稀釋成500ppm,250ppm
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與125ppm，再積分其面積。其總面積為1000ppm的0.493，
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0.248與0.123。再測試樣品，將樣品312nm位置的總面積
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與1000ppm的面積去對比，進而得到其濃度！
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推
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你當你指導教授是學店出來的？ 隨便都是phD怎麼可能不懂u
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v
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Y大！謝謝你的指教！我老師是做理論的，但想要將理論
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計算和實際所做的對比！而原本我所使用的方式老師覺得
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沒有問題。但學長來一起討論後，提出用吸收值即可直
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接做為濃度的指標。但是我將濃度吸釋到200ppm以後，
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其吸引質卻比300ppm的高（積分面積是符合的）！但卻被
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質疑我濃度配錯（我配了10組做比較，互有高低）！因
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為有所疑惑才上來問問版上能否解答！
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檢量線：測量不同濃度與blank在特定波長下的吸收，然後找出
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訊號與濃度的關係，此時即可知道偵測極限與線性關係為何
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然後可以檢測自己配量的濃度，來測試檢量線的準確度
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uv吸收關鍵字：beer's law，濃度夠低時才適用
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當然，待測樣品濃度應落在檢量線內
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推
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你的待測物一定跟溶劑有很強的交互作用，才會分裂成一個
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能帶，變成吸收峰的狀況
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不然一般都是取最大吸收波長就好了
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兩種算法R平方是多少呢？ 我覺得選高的那個做XD
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謝謝T大！但我的樣品20ppm以下時，peak就完全偵測不
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到了！
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意思就是你的偵測極限或者誤差在 20 ppm 以上
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謝謝Y大！積分面積30ppm~500ppm R 平方是0.91！吸收
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度100ppm~500ppm R 平方是0.81(若是30ppm~500ppm是0.6
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2）
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在我個人的認知中，要做準確的定量的話，檢量線要三個九以上
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也就是R2=0.999以上
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從你參考
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抱歉，供你參考
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t大謝謝！我自已做icp時檢量線確實做到0.9999！用uv
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做檢量線時，連0.99都做不到！而我只是要找出最佳的
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鑑定方法！將其濃度帶入理論方程式中
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最後1點，若是用UV定量，吸收度須在1以內才會準確
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還有 25 則推文
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以UV 定量金屬離子是傳統分析了
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有沒有物種干擾，濃度範圍是否正確，取析收小於0.3
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是希望穿透要大於0.5
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避免分析物自己的作用，有些成份穿透到0.9都會做用
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不管是什麼，用線性區去定量是基本的
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R到0.61，線性都不線性了還套什麼式子
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前面有人提到能階變能帶，這是也許可以積分的原因
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就巨觀來說能帶的分佈受物種跟環境控制，積起來是1
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但是你也只拿到R=0.91
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配已知液試看看標準添加法吧
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F大！謝謝你的回應！我的樣品所測出的皆是以能量帶的
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方式所展現！我的樣品放置於空氣中或進行稀釋時，皆
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有還原現象產生。當還原現象產生時，在254nm的位置會
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有多ㄧ隻peak! 我舉個例子！若我一開始配置的是200ppm
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的溶液，在324nm的位置其吸收度與積分面積分別為1與10
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0！當我放置1天後或將其稀釋為1/5時！在254nm會多生
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成一隻peak!此時324與254的吸收度分別為0.55與0.15！
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而積分面積分別為72.8與27.1！
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故以我所做的實驗來看！吸收度並不合適做為依據
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此外關於r平方！若是用254與324的總面積來看！r平方=0
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.998
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還是建議你花點時間看一下beer's law, 中文資料不少
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還有濃度定量的手法
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看你的描述真的覺得問題不少，或是請教化學系分析組
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的人，自己的研究還是謹慎點
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投稿期刊這種手法容易被攻擊而忽略研究本身的意義
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樣品常常是現配現用，壞掉是你的責任
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稀釋會變表示樣品有交互作用
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溶液中常是能帶，吸收還是能用，能帶只是用積分的
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一點理由不是這樣就此解套
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以上，FYR
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嗯 如果你提出在空氣中會壞的問題 就容易被質疑東西不
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同 已經不是原先的物質 即使能用面積算 也會被講不同
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因為對你來說那是事實 但會多根peak就代表兩者之間有差
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不能視為同樣的待測物
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推
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直接標準品做檢量對照濃度就好 uv-vis濃度低誤差大
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金屬為何不用燒的？AA or ICP
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不是做儀分的會有這兩設備嗎？做儀分會問這個問題嗎？
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UV能測多低要看待測物的吸收係數大到什麼程度
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金屬離子有幾百幾千的，也有到幾萬的，常配到mM
07/03 10:33, 104F
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