[實驗] 蛋白免疫反應阻抗量測
第一次發文,不知道發在這裡對不對
想請教各位前輩
我的實驗是在金電極上做化學修飾以接上抗體來固定抗原蛋白,並量測其阻抗訊號做norm
alized來比較變化量
實驗裝置是採微流道設計,修飾步驟依序為
SH-PEG-COOH(12hr) > EDC/NHS(30min) > Anti-BSA-Rabbit(30min) > Biotin(30min) >
FITC-BSA(30min)
Biotin是作為Blocking使用
分別取修飾抗體後量測到的阻抗值作為對照組Z0,並取嫁接完抗原蛋白後量測到的阻抗值
作為Z1,最後Z1-Z0做Normalized得到結果
理論上做完修飾接完蛋白後阻抗值應該要增加才對
但不知為何我normalized結果都變負值
也就是說相較於修飾抗體後,接完抗原蛋白的阻抗值卻降低了
這個問題困擾我很久了,請各位前輩幫忙解答,感激不盡!
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