Fw: [請問] 科學研究-葡萄糖檢測

看板Chemistry作者 (183)時間10年前 (2014/04/14 23:50), 編輯推噓3(307)
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※ [本文轉錄自 ask 看板 #1JI_zj5G ] 作者: young1022 (183) 看板: ask 標題: [請問] 科學研究-葡萄糖檢測 時間: Mon Apr 14 23:31:55 2014 在下是個碩士生 最近在搞葡萄糖檢測 主要是利用葡萄糖氧化酶分解Beta-D-glucose所產生的H2O2 再與具有peroxidase activity的奈米材料與指示劑(TMB)反應產生顏色變化 目前遇到的問題是 我所購買的葡萄糖氧化酶(50kU)不會與beta-D-glucose反應,產生H2O2 實驗方法大致如下: 1.配置葡萄糖氧化酶溶液(1mg/mL)=取定量的酶溶於0.1M醋酸緩衝液中,等待混和均勻 直接放入-20度冰箱冷凍,要用時再拿出,於冰浴狀態下退凍。 2.配置葡萄糖溶液(0.5M)=取定量的beta-D-glucose溶於DI water。 反應架設: 將0.1ml酶溶液、0.1ml葡萄糖溶液及0.5ml磷酸鈉緩衝液(pH 7),添加於2ml大的eppendorf 再隔水加熱(37度) 可是在後續的檢測發現(添加奈米材料與指示劑) 上述的反應中,似乎沒有產生我要的產物(H2O2) 不知PTT版上的各位大大 有誰有做過類似的實驗 有沒有相關的經驗可以指導 因為實在找不到問題出在哪啊!!!!!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.115.63.221 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/ask/M.1397489517.A.150.html

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Chemistry板
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ※ 轉錄者: young1022 (140.115.63.221), 04/14/2014 23:50:22

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確定反應條件跟廠商建議沒有差太多?會不會是雙氧水分
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解?溫度有點高
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沒有作過,只是提供猜測
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先確認你的酵素活性 會不會是死掉了
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酵素反應溫度在30-40度是很常見的溫度 應該沒問題
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不知道要不要加cofactor? http://tinyurl.com/q5j4vhm
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酵素 來源很重要 不同廠商效果大不同
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請問cofactor是什麼東西呢
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04/21 22:14, , 11F
酵素是跟sigma所購買的 應該不會出問題
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文章代碼(AID): #1JJ0E_UL (Chemistry)