[請益]用HPLC分析咖啡因

看板Chemistry作者 (...)時間16年前 (2008/04/27 00:13), 編輯推噓1(1推 0噓 14→)
留言15則, 5人參與, 最新討論串1/1
因為最近做了一個實驗用HPLC去分析咖啡因 其中,按照步驟甲醇和水做為mobile phase 另外還要添加醋酸及醋酸鈉把pH值調成3.5 不知道最後這個步驟的原因是啥?? 煩請大家幫忙 自己是有去網路上搜 http://abrc.sinica.edu.tw/upload/post/20070725120047.pdf PDF前面幾張有講到pH值對band的影響 不知道跟這個有無關係?? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 221.169.231.196
推
04/27 00:17, , 1F
應該是為了防止caffein解離 解離後會拖尾
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喔~ 酸拖的可兇了 XD 不過大部份配水好像都會用buffer
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我之前沒有配buffer所以出來也都拖尾orz
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有沒有可能是因為column的關係？
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譬如silica column在酸中較穩定
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讓咖啡因的carboxylic acid不解離~不帶電
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就不會跟固定相會有nonspcific ionic interaction
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HPLC的書裡面都寫的很詳細喔~如果要用到HPLC
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建議去找一下這類的書看一下會比較好
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調到3.5跟咖啡因carboxylic acid 的pKa有關係
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所以如果是分離胺基酸pH會調到2.4的意思是一樣的
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ionic interaction 算是非共價鍵裡面比較強的
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所以要去除這個因素~這樣有解決到您的問題嗎?
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所以調到3.5就是不讓咖啡因解離帶負電
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04/28 23:37, , 15F
感謝大家的回答...
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