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討論串不好意思我又來問問題了 <囧
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#4
Re: 不好意思我又來問問題了 <囧
推噓7(7推 0噓 2→)留言9則，0人參與, 最新作者sGoat (無三小羚羊)時間19年前 (2006/04/08 18:46), 編輯資訊
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其實nest還有分.... 你可以用一對或是兩對primer做nest.... 用一對做的意義是如同上述的放大產物量.... 用兩對做的意義是產物更專一性.... (因為第一次的產物若可以被第二對primer擴增出來,即代表是同一段序列). 用兩對的方法常在RACE的kit中看到.... 以上補充.
#3
Re: 不好意思我又來問問題了 <囧
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者goodman1 (帥哥皮 好人骨)時間19年前 (2006/04/07 18:52), 編輯資訊
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嗯嗯，謝謝 T＿T 真是詳盡的圖解，太感動了. 1.所以nested PCR是放兩組primer下去一起跑喔？（我以為是兩組分兩次跑說＠＠）. 2.我之前也有做bisulfite modify，不過後面有用DNA purification的kit去純化DNA. 然後只有跑一次PCR，band是蠻清楚
(還有305個字)
#2
Re: 不好意思我又來問問題了 <囧
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者yitingg (婷)時間19年前 (2006/04/07 16:12), 編輯資訊
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詢問了有做過methylation analysis的同學解答. 這是做nested PCR. 因為bisulfite所使用的DNA量非常的少,還要進行一些純化的動作. 如果只做一次PCR在gel上是看不出來的,. 所以經由nested PCR產生大量的product來進行接下來的實驗,ex:定序.
(還有220個字)
#1
不好意思我又來問問題了 <囧
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者goodman1 (帥哥皮 好人骨)時間19年前 (2006/04/07 01:05), 編輯資訊
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<囧. 這次的問題是「在什麼樣的情況下會跑兩次PCR」？. 原文出處：Clin Genet 2004 67:267-9. 原文：For methylation analysis on GRB10,. the genomic DNA was bisulfite modified as previous
(還有560個字)
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