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討論串[求救] long pcr p不出來
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Re: [求救] long pcr p不出來
推噓1(1推 0噓 6→)留言7則，0人參與, 最新作者e2653495 (melanogaster)時間14年前 (2012/03/27 18:15), 編輯資訊
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有smear是product還是template?. 在product表示Ｐ到很多東西，很雜，專一性不夠. （可能是primer，可能是PCR條件沒抓好）. 如果是 template表示DNA斷光光，要Ｐ出東西會有困難，. 也有可能是template濃度太高，請稀釋。. 建議你採取nest PCR方
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[求救] long pcr p不出來
推噓5(5推 0噓 9→)留言14則，0人參與, 最新作者sylvialalala (sylvia)時間14年前 (2012/03/24 15:32), 編輯資訊
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目標是15k的genomic dna. 使用了好幾種方法都P不出來. Polymerase是kapa的long range hotstart pcr. 號稱最多可P到20k. 我的做法:. 一開始怎麼P都是smear，懷疑是primer太短(20 bp)_. 後來改成28~30 bp的primer去
(還有154個字)
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