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討論串[求救] PCR問題,無法得到目標產物
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Re: [求救] PCR問題,無法得到目標產物
推噓3(3推 0噓 0→)留言3則，0人參與, 最新作者kingtiger (~（⊙ｏ⊙）~)時間15年前 (2010/11/23 14:40), 編輯資訊
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我是原po. 後來我兩個基因都得到了. 主要改進的地方有兩個. 第一個是延長primer (20mer->24mer). 成功率就提高了. 並且將primer設計在CDS的頭尾處,之前是設計在mRNA的區域. 第二個部份是我換了不同cell line的cDNA. 其中一個基因的表現在MCF7中有過表
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[求救] PCR問題,無法得到目標產物
推噓2(2推 0噓 4→)留言6則，0人參與, 最新作者kingtiger (~（⊙ｏ⊙）~)時間15年前 (2010/11/03 11:17), 編輯資訊
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我目前進行的是cell cDNA 的PCR. 有兩個目標基因,741bp和608bp. 分別由NCBI上兩者的mRNA sequence進行primer的設計. PCR的酵素為advantage PCR. 條件如下:. 10X buffer 2.5 ul. 10uM primer 1 1ul. 10
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