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討論串[求救] 我的western><~~~~~~~~

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Re: [求救] 我的western><~~~~~~~~

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者sisyphus (變形蟲)時間18年前 (2007/11/23 14:06)資訊

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膜上面有蛋白但是壓不出來~~. (多問一下~你確定膜上面有蛋白?). 接下來是. 1. blocking 跟這個沒關係~~有問題的話會出現雜訊. 以你的情形應該是寧願有雜訊吧 XD. 2. 一抗+wash. 3. 二抗+wash 個人認為這個最有可能. 請檢查你的antibody dilutio

(還有106個字)

Re: [求救] 我的western><~~~~~~~~

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者malakaki (神奇小馬)時間18年前 (2007/11/22 19:34)資訊

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哪一家? Millipore嗎?. 可以調降2抗濃度~ 試試看 1:10000~1:20000. 還有,15分鐘太久了,照你狀況看來. 建議在 10~30秒內,壓片完成. 當黃色的band出現時,代表著2抗上的HRP已經消耗完畢了. 沒有HRP,不管你壓多久都沒用了 ^^. 跟別的實驗室借新鮮的Ma

(還有43個字)

Re: [求救] 我的western><~~~~~~~~

推噓1(1推 )留言3則，0人參與作者dorphilvet ( )時間18年前 (2007/11/21 14:36)資訊

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membrane上有黃黃的band. 表示一定有，而且很強. 應該不會壓不出來. 是不是顯影劑有問題，該換了吧. 我們的卡匣都會在角落邊邊貼一個瑩光貼只. 像小星星或月亮或愛心那種小小的. 一來可以辨識方向，二來可以看洗片. 如果連小星星都壓不出來，那就是顯影劑的問題了. 不然就是您的底片是單面的，

Re: [求救] 我的western><~~~~~~~~

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者iiidns (大野狼)時間18年前 (2007/11/21 14:19)資訊

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以前曾經因為反應的band很強. 所以在壓片完後 membrane上會出現像DAB呈色的band. 而且位置也是相同的那是反應太強. 可以試著把membrane用DAB呈色也順便留下另外的紀錄. 開始想是不是顯影劑定影劑還是底片的問題?!. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc

Re: [求救] 我的western><~~~~~~~~

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者babyfinerain (心香水)時間18年前 (2007/11/21 13:38)資訊

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是小片的page. 但是我之前都是加完ECL拿起來放到片夾中. 約15分鐘路程去壓片. 都很OK阿. 不過我昨天換別的ECL. band還是沒壓出來. 可是在膜上真的出現黃黃的band. ><~~真的不曉得到底是怎樣. 為什麼band都出現在不該出現的地方><????. --. ※ 發信站: 批踢踢

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