[求救] H1299 細胞型態異常

看板Biotech作者 (Shiburin)時間1年前 (2023/04/01 16:10), 編輯推噓1(106)
留言7則, 3人參與, 1年前最新討論串1/1
各位好, 用H1299細胞進行實驗到現在已經約3年還是第一次遇到這個無解的問題, 最近細胞養到後面會有明顯異常的型態變化,但遲遲找不到可能的原因, 希望對細胞培養有經驗的前輩能分享一些看法。 https://imgur.com/2lQiF4i
https://imgur.com/6AqjJoR
上圖為該細胞從液態氮解凍48小時後的型態, 看起來排列規則整齊,培養基背景乾淨,一切正常。 https://imgur.com/IfryXQA
https://imgur.com/afmPpic
上圖為最近細胞培養大概6-7代之後開始細胞會有很明顯異常的型態變化 看起來會有點皺縮和爛爛的樣子,且背景的細胞碎屑明顯增多, 有確認過非細菌和黴漿菌汙染, 培養箱最近也有校正跟滅菌過, 實驗室另外一個養該細胞的同學也沒有遇到這種情況, 我自己也是第一次遇到,有把medium跟FBS全部換新但還是發生一樣的情況, 已經被這問題困擾3個多月沒辦法進行實驗。 不知道有沒有人有遇過類似的問題,或著能分享可能可以修改的地方? 若有需要我提供更詳細的資訊也請告訴我,謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.71.144 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1680336624.A.07C.html

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你細胞是不是有點太滿了,你上面第一張圖也有這種transform
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ation,有時候密度也會影響,我1299是沒有遇到這種狀況,但
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有其他株是密度太高就會變形
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同樓上覺得有點滿
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謝謝樓上兩位提供的看法,其實最近再更細節觀察發現還
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會伴隨trypsinzation沒辦法完全detach細胞的狀況,我
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會嘗試看看再較低的confluence進行繼代,先謝謝兩位了
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