[求救] protein sample煮過頭

看板Biotech作者 (migration)時間2年前 (2022/03/22 16:18), 2年前編輯推噓7(7推 0噓 14→)
留言21則, 10人參與, 1年前最新討論串1/1
今天收了蛋白，定量完加好sample buffer，一般都是丟到乾浴槽，95度煮15分鐘 結果沒聽到timer聲音，等發現去收的時候已經煮了45分鐘 ，蓋子有緊、水也還在 想問這樣的sample還跑的出東西嗎QQ ----- Sent from JPTT on my iPhone -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.247.128.68 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1647937124.A.093.html
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03/22 17:43, 2年前 , 1F
定量完有剩就花15分鐘重配重煮啊
03/22 17:43, 1F
推
03/22 21:42, 2年前 , 2F
我跑過 會有大量 degrade form 建議就丟了吧
03/22 21:42, 2F
推
03/23 02:50, 2年前 , 3F
我也跑過 是覺得沒有到需要很擔心的程度 可以跑看看 我
03/23 02:50, 3F
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03/23 02:50, 2年前 , 4F
有一次加熱完忘記冰 也還好 但不要這麼粗心啦 我那時
03/23 02:50, 4F
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03/23 02:50, 2年前 , 5F
候真的太忙很多實驗疊在一起了
03/23 02:50, 5F
推
03/23 10:49, 2年前 , 6F
看蛋白質本身特性 有的序列容易degrade或氧化
03/23 10:49, 6F
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03/24 15:17, 2年前 , 7F
自己來回覆一下，今天跑了internal control跟p-NF-kB，
03/24 15:17, 7F
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03/24 15:17, 2年前 , 8F
是都有跑出來，major band還滿清楚（p-NF-kB背景髒一點
03/24 15:17, 8F
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03/24 15:17, 2年前 , 9F
），看起來有驚無險
03/24 15:17, 9F
推
03/24 22:05, 2年前 , 10F
你的帳號居然是migration
03/24 22:05, 10F
咦？對啊，是認識的人嗎QQ
推
03/24 23:25, 2年前 , 11F
爆掉啦
03/24 23:25, 11F
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03/27 16:57, 2年前 , 12F
可是這結果也無法放在最終結論裡吧？不然還得在實驗方法中
03/27 16:57, 12F
對啊，但因為是還在抓條件，所以還好
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03/27 16:57, 2年前 , 13F
加註煮過頭……另外，內容物有沒有少還要看稱重。
03/27 16:57, 13F
※ 編輯: migration (27.246.193.75 臺灣), 03/30/2022 17:40:04 ※ 編輯: migration (27.246.193.75 臺灣), 03/30/2022 17:40:44
推
03/31 15:51, 2年前 , 14F
蓋子打開的話，就變超濃縮了 XD
03/31 15:51, 14F
推
05/26 23:43, 1年前 , 15F
上面說有些序列容易degrade?線性化後每個地方都是peptid
05/26 23:43, 15F
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05/26 23:43, 1年前 , 16F
e bond。序列是什麼理論上沒差吧？（我也有degrade的問
05/26 23:43, 16F
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05/26 23:43, 1年前 , 17F
題想求證原因
05/26 23:43, 17F
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11/08 23:59, 1年前 , 18F
個人淺見 硬要說應該是還原劑2-ME或DTT因水分少濃度變高
11/08 23:59, 18F
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11/09 00:04, 1年前 , 19F
我試過不同濃度還原劑 western gel smear form 會增加
11/09 00:04, 19F
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11/09 00:05, 1年前 , 20F
雖說都是一級結構 但還是有可能因溫度變高 還原劑變高
11/09 00:05, 20F
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11/09 00:06, 1年前 , 21F
有點影響
11/09 00:06, 21F
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