[求救] serum free medium pH 值
各位好，
目前使用 RPMI (serum free) 做實驗
配置時有先調到 pH7.0, 小蘇打也有加
也額外加至15mM的 HEPES了
配完後分裝到50ml tube,每次使用也都盡快蓋上，用完也封 paraffin 冰了
但大概做實驗2-3次就變粉紅色了…
(pH跳到大概8.5)
想請問有沒有延長讓他不要變鹼的方法呢？
PS.我自己養細胞用的 +FBS medium,變色速度就慢很多……一罐500ml 快用完才變
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我是配 medium時測，過0.22後立刻分裝的，大概變成pH7.2?
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影響算大，我要看kinase磷酸化用，實驗大概就5分鐘內...
pH如果跳掉會影響活化效果
是可以丟培養箱看看，但那可能也要丟上一兩個小時?
想到就有點麻煩...但可以試試
原本想用Opti-MEM覺得比較耐撐 (因為目的是要serum free)
但分裝到50ml後用個一兩次pH一樣跳到8以上囧
※ 編輯: tynse71864 (123.193.43.81), 03/27/2019 02:11:59
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好的我來試試看 謝謝大家啦！
0331： 我後來取了1.5ml放在 3cm dish 中，放了大概2-3 小時 pH 測起來還是在8左右
※ 編輯: tynse71864 (123.193.43.81), 03/31/2019 12:12:52
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PBS 我用起來pH 沒特別差 (HBss沒試過)
但畢竟是活細胞活化，可能還是有一些不知道的離子差 (比如 Calcium?) 文獻也幾乎沒看到用 PBS 的 ，真要使用有點怕
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我家用 Gibco的 RPMI 164powder, 該廠牌說明書是建議除了小蘇打外(此時pH約8.2)，還要用 HCl調到7.0左右才算能過濾
※ 編輯: tynse71864 (223.136.137.84), 04/04/2019 19:19:49
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這我試過了，後來發現有些廠牌的 tube 特別容易變色………XD 換了廠牌有稍微沒那麼誇張啦
※ 編輯: tynse71864 (223.136.150.60), 05/12/2019 14:35:14