[求救] 重組蛋白的回溶與稀釋分裝buffer疑問

看板Biotech作者 (Shiburin)時間5年前 (2019/02/23 11:12), 編輯推噓2(2推 0噓 3→)
留言5則, 3人參與, 5年前最新討論串1/1
最近剛買了一管要用來做細胞實驗的recombinant protein 在回溶和稀釋分裝的buffer上面有點疑問 Reconstitution buffer在CoA上已經清楚的註明了 是用10mM Citric Acid, pH 3.0 回溶到0.1~1.0 mg/ml 這邊沒有任何疑問 但是在下一步的稀釋分裝的描述我不太懂他的意思 寫說可以透過further dilution in buffer containing a carrier protein (example 0.1% BSA) 然後分裝後凍在-20~-80 這邊的buffer containing a carrier protein 是要把0.1% BSA溶在什麼buffer裡面再用它來進一步稀釋我的protein? 是可以直接用0.1%BSA in PBS嗎? 還是要用什麼呢? 不好意思第一次溶這種還需要再稀釋分裝的Protein 還請大家幫忙解答 謝謝！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.49.54 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1550891549.A.9D7.html
推
02/23 18:15, 5年前 , 1F
10mM CA + 0.1%BSA吧 PBS跟CA 的pH值差很多耶
02/23 18:15, 1F
推
02/23 18:24, 5年前 , 2F
意思是10mM CA再加BSA到0.1%。原因在於添加BSA可以幫助
02/23 18:24, 2F
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02/23 18:26, 5年前 , 3F
穩定你的蛋白質，減少降解的機會並且可以讓你以更稀的濃
02/23 18:26, 3F
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02/23 18:26, 5年前 , 4F
度分裝保存
02/23 18:26, 4F
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02/23 22:38, 5年前 , 5F
OK~ 謝謝大家~
02/23 22:38, 5F
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