[討論] trizol 抽RNA時的問題

看板Biotech作者 (MADAO)時間5年前 (2018/11/17 20:44), 5年前編輯推噓2(2推 0噓 3→)
留言5則, 3人參與, 5年前最新討論串1/1
我是抽 cell culture 的 RNA 一般來說 protocol 會要求加 chloroform 後強力 vortex 2分鐘，離心後會有明顯均勻 的三層。 但是其它地方好像也有上下搖晃十幾下就好的方式，離心後最下方就會有不均勻透明層出 現 https://youtu.be/_nm2gzac-qw
想問一下有人知道這兩種做法抽出來的 RNA 的 260/280 260/230 quality 或是濃度有甚 麼不同之處嗎？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 123.194.160.138 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1542458678.A.194.html
推
11/17 21:54, 5年前 , 1F
重點是isopropanol沉澱久一點 其他還好 個人建議不要vort
11/17 21:54, 1F
→
11/17 21:54, 5年前 , 2F
ex
11/17 21:54, 2F
推
11/17 23:25, 5年前 , 3F
混勻後放冰上靜置，分層後再離心效果會好些
11/17 23:25, 3F
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11/17 23:26, 5年前 , 4F
invert就可
11/17 23:26, 4F
所以為了怕避免 DNA 或 chromatin 污染不建議vortex就是了是吧 ※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:14 ※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:41
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11/18 05:54, 5年前 , 5F
怕你把rna搖斷 ph會把dna推到interface
11/18 05:54, 5F
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