[求救] 如何將96 well的medium和wash去除乾淨

看板Biotech作者 (DrunkenBlue)時間5年前 (2018/09/05 15:59), 編輯推噓4(4018)
留言22則, 4人參與, 5年前最新討論串1/1
大家好 關於96 well在操作上有些問題希望可以請教 最近在利用96 well做細胞在無血清環境中的耐受能力, 實驗是會在96 well內Seeding一定數量的細胞overnight之後, 將medium去除並以PBS wash之後,將實驗組換成不含血清的培養基 但是發現每次在去除medium和wash的PBS之後, 在顯微鏡下都會看到可能有些well內的細胞會突然"空"掉一塊 推測可能是用八爪去掉medium時有不小心刮到 我的操作流程基本上是: 會用八爪插上300ul的tip後再插上20ul的tip去吸掉medium 然後取200ul PBS抵著well的邊邊輕輕加入 再用相同的方式去掉PBS後補回相對應的medium 不知道各位在操作這種要對96 well內細胞去除medium並wash的實驗時 有沒有什麼技巧能不讓細胞有流失 另外想請問在我第一次有先將含血清培養基去乾淨的情況下 96 well以"200ul PBS wash一次"有辦法將血清去除乾淨嗎? 希望能得到各位的經驗分享 謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 39.10.9.187 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1536134367.A.A17.html

09/05 18:01, 5年前 , 1F
https://goo.gl/hSo4Pg 用這種的吸 然後你的細胞是?
09/05 18:01, 1F

09/05 18:11, 5年前 , 2F
我們家只有8爪QQ 細胞是A549和1299 貼附型的肺癌細胞
09/05 18:11, 2F

09/05 18:11, 5年前 , 3F
*H1299
09/05 18:11, 3F

09/05 20:08, 5年前 , 4F
也可以考慮用無血清培養基多清洗幾次,一般培養基其實沒很貴
09/05 20:08, 4F

09/05 20:08, 5年前 , 5F
,血清比較貴
09/05 20:08, 5F

09/05 21:49, 5年前 , 6F
對耶 Hmm.. 我都沒想到這個 謝謝你的建議!!
09/05 21:49, 6F

09/05 21:53, 5年前 , 7F
看來你只能練空中甩盤了 PBS補到200 然後甩乾 不用拍盤
09/05 21:53, 7F

09/05 21:53, 5年前 , 8F
重覆兩次必乾淨.. 至少我拿MDCK做TICD50這樣很OK 沒遇過
09/05 21:53, 8F

09/05 21:53, 5年前 , 9F
血清干擾... 問題只在熟練程度而已Orz
09/05 21:53, 9F

09/05 22:40, 5年前 , 10F
我原本也是想說用這種方式看看XDD
09/05 22:40, 10F

09/05 22:40, 5年前 , 11F
只是在hood裡面感覺不太好操作哈哈
09/05 22:40, 11F

09/05 22:41, 5年前 , 12F
方便把甩的動作解說的詳細一點嗎?
09/05 22:41, 12F

09/05 22:44, 5年前 , 13F
我自己是想說快速反過來向下倒掉液體之後蓋在擦手紙上
09/05 22:44, 13F

09/05 22:44, 5年前 , 14F
把well洞口的液體沾乾 不知道這樣O不OK?
09/05 22:44, 14F

09/06 00:48, 5年前 , 15F
拿一個乾淨的大petri dish 或大塑膠盆... 倒置之後在空中
09/06 00:48, 15F

09/06 00:48, 5年前 , 16F
向下抖抖抖...震震震 多練幾次就熟練了XD 別用擦手紙啊
09/06 00:48, 16F

09/06 00:48, 5年前 , 17F
我待過某lab是用金貝利面紙拿來吸 因為擦手紙髒髒會污染X
09/06 00:48, 17F

09/06 00:48, 5年前 , 18F
D
09/06 00:48, 18F

09/06 00:49, 5年前 , 19F
就我經驗 pbs越多反而甩得越好越乾XD
09/06 00:49, 19F

09/06 01:22, 5年前 , 20F
你是空邊邊 還是空中間?
09/06 01:22, 20F

09/06 09:26, 5年前 , 21F
jabari: 了解了~ 感謝你的分享XD
09/06 09:26, 21F

09/06 09:27, 5年前 , 22F
MDCC:我是會空最外面一圈~
09/06 09:27, 22F
文章代碼(AID): #1RZupVeN (Biotech)