[求救] Phage amplification消失
各位版友好,我目前遇到一個問題。實驗室需要將phage放大到10的11次方,但嘗試多次仍無法達到如此高的titer。以下是多次的實驗方法,請各位幫我看看哪裡可以改進QQ
(1)10ml菌液搖菌至OD600=0.5-1,加入1ml 10的九次方的phage,共培養8小時,shaking 150 rpm。最終以1ml的sm buffer回溶,得到titer是2*10的九次方
(2)1ml菌液搖菌至OD600=0.5-1,加入100ul 10的八次方的phage,共培養8小時,shking 150 rpm。離心後得到的phage液再加入10ml菌液中共培養8小時。再離心後得到的phage液加入200ml的菌液中,共培養8小時。也就是逐次放大的概念,最後以1cc sm buffer回溶。
這種方式有成功過一次,但之後就再也沒成功過了,之後得到的titer也是落在10的九次方左右。
之後還試了不同體積的菌液與不同titer的phage共培養的組合,但是做出來也都差不多10的九次方。
因此希望有做過相關實驗的版友們能幫幫忙QQ
感謝各位!
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