[求救] 數個實驗圖表請教(新增一問)

看板Biotech作者 (bridgez)時間6年前 (2017/12/10 15:34), 6年前編輯推噓6(6017)
留言23則, 5人參與, 6年前最新討論串1/1
大家好邊緣人專討讀論文有幾個問題想請教 出處 https://bmcplantbiol.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12870-017-1175-3 新增問題的論文出處 https://tinyurl.com/y92rvuem 不好意思我得再問一個問題 https://imgur.com/0wU99Sg
這個圖大概是在講AtMPC1會和NRGA1形成蛋白質複合體(丙酮酸運輸蛋白) 因此都存在時才有辦法回復缺失mpc1~3突變株的生長狀況(除了mpc1株只需AtMPC1) 請問為什麼用YPAD和SC-Ura-Leu plate培養酵母呢? 我只能大概猜測是缺乏營養之類的 但是不能理解YPAD與SC-Ura-Leu plate及酵母菌及突變株的關係 煩請解答 感謝! 問題一 主要是講位於植物粒線體上的運輸蛋白mpc1 其功能是將pyruvate從細胞質運輸到粒線體 首先用四種基因型的阿拉伯芥做實驗 col-0 (Wild Type) mpc1 (T-DNA插入WT序列中,導致WT的AtMPC1基因不表達) OE lines (利用cDNA過表達AtMPC1) Complementation lines(C lines)(將AtMPC1用cDNA轉入mpc1株) 我有問題的是C lines 實驗結果C lines幾乎都跟WT一樣 請問這種特地把基因轉入不表達株造成與WT相似的結果有什麼目的呢? 問題二 https://imgur.com/PWoeCc7
我不知道該如何讀這張圖表 這是利用patch clamp檢測細胞膜上陰離子通道(s-type)的流量 ABA會導致流量增加 請問為何左圖的電流每一塊都有那麼多條線? 請問為何要特地做出右圖這種圖表,我以為有左圖就可以表達流量增加了? 大恩大德 感激不盡 我真的不知道可以找誰問了QQ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 218.166.34.201 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1512891273.A.627.html

12/10 16:09, 6年前 , 1F
一就是確定mutant和WT不一樣是因為這個基因不見,而不
12/10 16:09, 1F

12/10 16:09, 6年前 , 2F
是因為其他因素造成的,因為當我把這個基因弄回來之後(
12/10 16:09, 2F

12/10 16:09, 6年前 , 3F
C lines)就復原了
12/10 16:09, 3F

12/10 16:10, 6年前 , 4F
二交給樓下
12/10 16:10, 4F

12/10 16:14, 6年前 , 5F
謝謝
12/10 16:14, 5F

12/10 16:14, 6年前 , 6F
喔雖然a圖原理我看不懂不過b圖就是把a圖的4個line畫在
12/10 16:14, 6F

12/10 16:14, 6年前 , 7F
同一個圖表上以利比較
12/10 16:14, 7F

12/10 17:26, 6年前 , 8F
左圖是利用不同Voltage收固定時間畫出來的圖
12/10 17:26, 8F

12/10 17:27, 6年前 , 9F
右邊則是每組的voltage vs pA的結果圖
12/10 17:27, 9F

12/10 17:28, 6年前 , 10F
左邊每條線對應右邊的一個點
12/10 17:28, 10F

12/10 17:29, 6年前 , 11F
Ref6 Science那篇的Fig有比較詳細的解釋
12/10 17:29, 11F

12/10 17:36, 6年前 , 12F
非常非常感謝兩位Q_Q
12/10 17:36, 12F
※ 編輯: bridge850108 (218.166.34.201), 12/11/2017 00:43:18 ※ 編輯: bridge850108 (218.166.34.201), 12/11/2017 00:46:21

12/11 04:37, 6年前 , 13F
新的問題應該跟代謝路徑有關,查查看TCA cycle跟蛋
12/11 04:37, 13F

12/11 04:37, 6年前 , 14F
白質生合成之間的關係
12/11 04:37, 14F

12/11 06:29, 6年前 , 15F
YPD是很肥的標準medium SC是合成的defined medium
12/11 06:29, 15F

12/11 06:30, 6年前 , 16F
突變株掛掉某個pathway之後 缺乏某幾個aa就會讓合成的
12/11 06:30, 16F

12/11 06:30, 6年前 , 17F
下游走不下去 就會長不出來
12/11 06:30, 17F

12/11 06:31, 6年前 , 18F
確認掛掉的gene跟這個pathway真的有關
12/11 06:31, 18F

12/11 10:58, 6年前 , 19F
非常感謝!
12/11 10:58, 19F

12/12 02:22, 6年前 , 20F
-Ura是因為跟用來篩vector
12/12 02:22, 20F

12/12 02:25, 6年前 , 21F
leu的生成需要pyruvate 所以-Lue用來檢驗carriers 的
12/12 02:25, 21F

12/12 02:26, 6年前 , 22F
能力
12/12 02:26, 22F

12/12 09:03, 6年前 , 23F
謝謝!
12/12 09:03, 23F
文章代碼(AID): #1QBEE9Od (Biotech)