[求救] 細胞莫名死亡(污染?)

看板Biotech作者 (icloudy)時間6年前 (2017/09/23 00:52), 6年前編輯推噓0(009)
留言9則, 5人參與, 最新討論串1/1
如題 上個月新養了某細胞 野生種加上基因knock out總共三種 奇怪的是, 學長姐分給我一盤細胞後 我第一次culture完,細胞生長正常 但第二次culture後,細胞會浮起死亡 (很多次了,都是我culture第二次後就死掉) 給老師看過後還是找不出原因 因為 1.medium沒有混濁 2.拿到高倍顯微鏡下看也沒有細菌等等微生物的蹤跡 3.會發生同時間culture的另一種type生長的很好但另一種死光光的情形 4.同實驗室的人細胞都沒有污染,排除是器材問題 這種情況第一次發生後 就換了medium、PBS、trypsin 但還是繼續發生... 想問版友有人發生過這種情況嗎? 或是有什麼好建議呢... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.171.45.119 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1506099158.A.F5D.html ※ 編輯: icloudy (1.171.45.119), 09/23/2017 00:59:08

09/23 01:03, , 1F
是只有ko line沒事,parental死掉吧?
09/23 01:03, 1F
都會死掉QQ但有其中一個ko沒那麼容易死 ※ 編輯: icloudy (1.171.45.119), 09/23/2017 01:06:31

09/23 01:16, , 2F
那需要去查查medium被額外添加什麼了
09/23 01:16, 2F
謝謝B大回文(感激)學長姐用同配方medium養同樣細胞,雖然細胞會慢慢變得不健康,但還 是能活很久,沒有像我一樣很快死掉唉 ※ 編輯: icloudy (1.171.45.119), 09/23/2017 01:23:49

09/23 04:37, , 3F
medium是用那個牌子和批號,可以幫你看看
09/23 04:37, 3F

09/23 08:41, , 4F
縮短個人操作時間,以及儘量緩和操作手法呢?看看會不會改善
09/23 08:41, 4F

09/23 10:04, , 5F
從描述用詞及不熟悉培養的狀況,很像是抗生素造成的
09/23 10:04, 5F

09/25 20:06, , 6F
會不會是在trypsin處理時操作太久,前面幾盤接觸trypsi
09/25 20:06, 6F

09/25 20:06, , 7F
n太久
09/25 20:06, 7F

09/25 20:08, , 8F
不過第一次culture沒事...
09/25 20:08, 8F

10/17 23:59, , 9F
細胞的代數幾代了啊?會不會是太老?或是你的滿度太滿?
10/17 23:59, 9F
文章代碼(AID): #1PnJ_MzT (Biotech)