[求救] 跑10kD以下的蛋白，推薦何種SDS-PAGE

看板Biotech作者VincentYan (VincentYan)時間7年前 (2017/07/24 14:59)推噓5(5推 0噓 7→)

留言12則, 7人參與討論串1/1

請問版上的各位大大小弟我有一個蛋白(peptide)的分子量約5-10 kD之間，嘗試很多種Tris-glycine gel，E. g. 自製的16%或預鑄8-16% gradient gel (GE的，但已停產)，但都一直跑不出來，dye f ront始終停在10 kD就不能再跑下去了(有用小分子量的protein marker，<10 kD marker 跑得出來)，後來發現原因可能是膠的分離範圍在10kD已是極限了(推測) 最近想改試Invitrogen NuPAGE 4-12%，搭配MES buffer，根據官網(https://goo.gl/uRa BjV)表示: 分離範圍最小可到3.5 kD 不曉得有沒有版友試過此預鑄膠，可以分享意見，或是推薦跑10 kD以下蛋白的方法感恩不盡>< -- Sent from my Windows -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.4.190 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1500879586.A.CEF.html

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VincentYan

07/24 15:01, , 1^F

07/24 15:01, 1^F

推

Ianthegood

07/24 15:40, , 2^F

07/24 15:40, 2^F

會跑gradient是因為同時還有其他>50 kD蛋白被表現; 跑15 kD ok, 但我要看的是10以下的啊 ※ 編輯: VincentYan (140.112.4.208), 07/24/2017 15:58:51

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aj1139

07/24 17:23, , 3^F