[求救] 石蠟切片脫蠟後掉片很嚴重
大家好
第一次發文
排版不好請見諒~
我是用小鼠大腦的石蠟切片
要做IHC
切完片tissue的形狀還很正常
但是在 Xylene => 酒精 的脫蠟後就脫片非常嚴重
好一點這樣
http://imgur.com/hJpkVOH
慘一點就會這樣
http://imgur.com/a/jirM6
就算沒有脫也會有點裂
用了很多方法都沒辦法解決
請大家幫幫忙~
Condition：
sample：4%甲醛灌流後，泡在甲醛中overnight，送學校的組織中心脫水和包埋
切片前將石蠟放在冰上約30min
切片厚度：5um
玻片:matsunami frontier FRC-11 (網站上說coating MAS)
展片：約45度的自來水
烘片：放在烘片機上overnight (約45度)
~
脫蠟：
烤片：65度,10min(也有過65度,1hr,但沒差很多)
Xylene(2*10min) => 100%酒精(2*2min)
=> 90%酒精 => 80%酒精 => 70%酒精(各2min) => PBS(3*2min)
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.116.60.13
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1498541105.A.427.html
推
06/27 13:49, , 1F
06/27 13:49, 1F
所以是技術的問題囉 QQ
→
06/27 13:55, , 2F
06/27 13:55, 2F
→
06/27 13:57, , 3F
06/27 13:57, 3F
→
06/27 15:17, , 4F
06/27 15:17, 4F
感謝～我問看看
→
06/27 19:01, , 5F
06/27 19:01, 5F
我還沒到煮沸就掉片了 QQ
推
06/28 15:40, , 6F
06/28 15:40, 6F
65度O/N嗎？
→
06/28 20:44, , 7F
06/28 20:44, 7F
→
06/28 20:45, , 8F
06/28 20:45, 8F
好像有聽說APS和PLL比較適合？
但我們家還有好多MAS的 QQ
※ 編輯: nnn79 (223.138.98.28), 06/29/2017 10:40:54
→
06/29 12:05, , 9F
06/29 12:05, 9F
推
08/07 13:16, , 10F
08/07 13:16, 10F