[討論] 關於胞外internal control

看板Biotech作者 (小負)時間7年前 (2017/05/05 12:42), 編輯推噓6(6推 0噓 6→)
留言12則, 6人參與, 最新討論串1/1
各位先輩 各位強者大大大家好 今天對外報告我做的實驗 其中有一個實驗是看細胞胞內胞外蛋白表現量 其中胞內沒什麼問題 就是收細胞定量跑WB，internal control就用蛋白骨架 胞外就是收下condition medium 然後使用濃縮離心管將多餘的medium離下來 然後依照藥物濃度組別load gel，也可以知道藥物濃度越高，胞外蛋白越少 但是剛剛被質疑沒有control，不過實驗室歷年來都是用各個濃度的組別比較 沒加藥的組別，所以想請問各位強者，胞外蛋白有internal control嗎? 還是我們實驗室的做法其實就可以了 先在這謝謝各位了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.122.143.253 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1493959331.A.0A1.html
推
05/05 13:24, , 1F
total protein也可以，可以用ponceauS 或有些膠可以直接顯出
05/05 13:24, 1F
→
05/05 13:24, , 2F
蛋白量
05/05 13:24, 2F
推
05/05 13:36, , 3F
同1F; 若PS染不出東西， WB抗體壓完再染 CMB也可
05/05 13:36, 3F
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05/05 15:12, , 4F
可以用Fascin-1
05/05 15:12, 4F
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05/06 00:30, , 5F
同上total protein 太少就銀染吧
05/06 00:30, 5F
推
05/08 22:18, , 6F
medium有加血清嗎? 全蛋白質測定可能會有血清影響
05/08 22:18, 6F
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05/08 22:19, , 7F
我覺得只要將各組別的細胞量拿出來做normalize就好
05/08 22:19, 7F
推
05/11 12:21, , 8F
想問一下要怎麼將細胞量定量？刮下來用BCA定量可以嗎？
05/11 12:21, 8F
→
05/11 18:56, , 9F
要抽完protein才能測啊 直接BCA細胞也太狂XD
05/11 18:56, 9F
推
05/15 13:41, , 10F
j大應該是指細胞數吧？
05/15 13:41, 10F
推
05/18 02:54, , 11F
我是覺得用細胞內的細胞骨架來當作細胞數normalize
05/18 02:54, 11F
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05/18 02:56, , 12F
就好,但如果還是被質疑的話也只好數細胞了
05/18 02:56, 12F
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