細胞存活率實驗問題

看板Biotech作者s9527543 (s9527543)時間7年前 (2017/01/12 14:24)推噓1(1推 0噓 7→)

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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出以方便板友幫您追蹤問題若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，請務必註明貴實驗室願意設立正式合作或簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 我目前是大二上剛結束,進實驗室也有2個月開始跟實驗到現在有些問題不太了解,也找不太到合理的答案所以在這邊問一下,實驗室目前是在做藥物促進細胞凋亡來抑制癌細胞生長的實驗,現在剛接觸到細胞存活率實驗MTT,實驗步驟是: 種細胞在24well>>>貼附16小時>>加藥後分別等24,36,48小時以MTT測細胞存活率,有些問題想請教: (1)MTT的濃度是5mg/ml,作用時候會用DMEM以1:9的比例稀釋配成 300ul/well加到 24well反應1小時,但是在收24小時時間點時候的 control組,570nm測OD值一定會out,這麼一來就沒辦法很準確判斷 24小時IC50,種細胞是25000/well,但是也不能將細胞數降太低請問有什麼辦法可以解決? (2)下藥24well為1ml的DMEM含不同同度的藥物,如果說1ml的劑量只能維持到36小時,而 48小時OD開始回升,那為什麼不直接把劑量提高就好呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.128.65.187 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1484202288.A.F37.html

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