[求救] lentivirus concentration

看板Biotech作者 (badguy)時間7年前 (2016/11/25 13:36), 編輯推噓6(606)
留言12則, 8人參與, 最新討論串1/1
各位好~小弟我因為lentivirus的titer不夠所以做了concentration, 但是re-titration後,titer好像沒有高多少,應該是我concentration失敗了, 我想請問是否有人做過virus的concentration? 可否給小弟一些建議? 以下是我concentration的步驟 ----------------------------------------------------------------- 材料: Spin-x UF 20 Spin tube 1.用無菌水prerinsing 3次。 2.將病毒在室溫下解凍。 3.將病毒取到 tube 裡。 4.用 3000g,4度,離心,每3到5分鐘檢查一次。 5.當病毒液到我要的量的時候停止離心。 6.使用0.2 filter 過濾病毒。 7.存放在 1.5ml 冷凍管,並放在4度冰箱,兩天後開始進行titration。 -------------------------------------------------------------------- 如果我步驟上有問題,還請各位不要客氣,用力鞭下去就對了! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.40.42 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1480052192.A.B52.html

11/25 14:40, , 1F
先濃縮再冷凍?
11/25 14:40, 1F

11/25 14:42, , 2F
4度C放兩天好像久了點
11/25 14:42, 2F

11/25 20:49, , 3F
.2 um filter?
11/25 20:49, 3F

11/26 21:56, , 4F
濃縮管 MWCO多少呢
11/26 21:56, 4F

11/28 12:25, , 5F
lenti比200nm小吧
11/28 12:25, 5F

11/28 23:27, , 6F
四度放太久了,病毒離開活體死得快~
11/28 23:27, 6F

11/28 23:28, , 7F
哪個系列的載體包的? 比例如何?
11/28 23:28, 7F

11/28 23:29, , 8F
.22 filter 是 PVDF or PES or?
11/28 23:29, 8F

11/29 16:25, , 9F
用簡單的glucose gradium搭配高速離心就可以解決了
11/29 16:25, 9F

11/29 23:10, , 10F
個人好奇這樣加速減速對病毒的套膜會不會有損害@__@
11/29 23:10, 10F

12/01 00:06, , 11F
之前用過超高速離心收,PBS均勻懸浮以後直接凍-80
12/01 00:06, 11F

12/01 00:07, , 12F
後來感染起來也沒什麼問題
12/01 00:07, 12F
文章代碼(AID): #1ODytWjI (Biotech)