[求救] 請問BrdU切片染色的hydrolysis條件
我之前細胞染BrdU一開始沒有加HCl,結果抗體都沒染到,螢光都留在細胞質(背景),
之後BSA前室溫2M HCl 10min,螢光就成功出現在核內和DAPI會重合。
現在我改用石蠟切片,HIER用過citrate pH6或TE pH9,煮沸10min,如果沒有
HCl染不上,但是我同樣用2M HCl室溫10min,結果也沒染到。
http://www.abcam.com/protocols/brdu-staining-protocol
我看ABcam protocol,有提到HCl後面接一個Borate Buffer說是
非必要,HCl卻又說有些實驗人員表示也沒必要。確實我看DNA denature的
步驟也有人用高溫解決,所以石蠟切片是HIER順便DNA denature嗎?
還是說切片 HCl要用更重或長時間?
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"Don't hate the player. Hate the game."
當看到哪個名人賺了大錢,領到高額補助或利息,不要去指責他,
而是要指責那個制度、創造那個制度的人,以及默許那個制度的人。
不然你認為一個人不領18%或是一個人不炒房價,就會改變整體環境嗎?
還不如改變【修改制度的人】,才能從根源改變一切。
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