[求救] 養細胞莫名死掉
各位好
小弟目前在養ips細胞並加藥讓它分化成肺前驅細胞
protocol是參考其他paper,使用的medium與factor幾乎都與paper相同
之前試著照protocol走個一兩次養起來都沒什麼問題
但是最近在加藥個2~3天後就會全部凋亡,理由還找不太到
以下是小弟想到的可能出問題的地方
1.medium
medium是一開始就事先同時配好2~3瓶,之前試做時都沒問題,我想應該不是medium
的問題
2.汙染
medium中有添加penicillin/streptomycin,之前養了2個月都沒出現汙染,也應該
不是這個問題
3.growth factor
factor是保存在冰箱裡,有需要時再拿出來加入medium中,再分配到各個well
factor有時會用完取新的stock出來解凍,不過其他人也有在用,我別的實驗
也有在用沒有出現問題,應該不是這個因素
想請問有經驗的各位,還有什麼原因會造成細胞凋亡呢
有什麼因素是我忽略的?
感謝大家
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看起來像necrosis
推
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有找過學長姐討論過 他們養的時候都沒有發生過這種問題 所以想問看看有沒有人
有類似經驗
※ 編輯: sam8789 (133.51.75.51), 07/11/2016 08:23:15