[求救] 養細胞莫名死掉

看板Biotech作者 (Déjà vu)時間8年前 (2016/07/09 12:47), 8年前編輯推噓1(105)
留言6則, 4人參與, 最新討論串1/1
各位好 小弟目前在養ips細胞並加藥讓它分化成肺前驅細胞 protocol是參考其他paper,使用的medium與factor幾乎都與paper相同 之前試著照protocol走個一兩次養起來都沒什麼問題 但是最近在加藥個2~3天後就會全部凋亡,理由還找不太到 以下是小弟想到的可能出問題的地方 1.medium medium是一開始就事先同時配好2~3瓶,之前試做時都沒問題,我想應該不是medium 的問題 2.汙染 medium中有添加penicillin/streptomycin,之前養了2個月都沒出現汙染,也應該 不是這個問題 3.growth factor factor是保存在冰箱裡,有需要時再拿出來加入medium中,再分配到各個well factor有時會用完取新的stock出來解凍,不過其他人也有在用,我別的實驗 也有在用沒有出現問題,應該不是這個因素 想請問有經驗的各位,還有什麼原因會造成細胞凋亡呢 有什麼因素是我忽略的? 感謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 150.29.55.18 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1468039623.A.E50.html

07/09 13:05, , 1F
是不是藥物汙染了? 我看你的三點都沒提到藥物
07/09 13:05, 1F

07/09 13:06, , 2F
另外P/S重複回溫太多次也有可能失活,建議跟medium一起
07/09 13:06, 2F

07/09 13:06, , 3F
重配過
07/09 13:06, 3F

07/09 13:20, , 4F
了解 我是打算這次我做新的還失敗 就全部重配過
07/09 13:20, 4F

07/09 21:31, , 5F
是apoptosis嗎 還是necrosis
07/09 21:31, 5F
看起來像necrosis

07/10 00:15, , 6F
請先找學長姊及指導教授討論.
07/10 00:15, 6F
有找過學長姐討論過 他們養的時候都沒有發生過這種問題 所以想問看看有沒有人 有類似經驗 ※ 編輯: sam8789 (133.51.75.51), 07/11/2016 08:23:15
文章代碼(AID): #1NW877vG (Biotech)